基于外周镇痛调节细胞免疫机制的电针抗癌性痛优势研究

采用Walker256乳腺癌细胞胫骨腔内注射建立大鼠癌性痛模型。以吗啡治疗为对照，从外周三种阿片肽及其受体的释放和激活情况、免疫细胞增殖活化及其亚群变化情况以及阿片受体拮抗剂纳洛酮对其的阻断效应，探讨电针对癌性疼痛和细胞免疫的双重良性干预作用，以期阐释电针的治疗优势效应；进一步通过体外观察生理浓度（与电针刺激阿片肽释放量相当）和药用浓度（与吗啡给药后血药浓度相当）的阿片肽（以β-内啡肽和吗啡为例）对癌性痛大鼠外周T淋巴细胞增殖、分泌功能及其表面阿片受体表达的干预，探讨不同浓度不同种类的阿片肽在参与细胞免疫调节作用的异同，以期阐明电针调节癌性痛大鼠细胞免疫的作用机制。本研究结果将有助于推动针灸疗法在癌性痛等慢性疼痛的临床治疗中的应用，同时也为癌性痛等慢性疼痛的临床治疗提供一种新的治疗思路和治疗策略（镇痛与免疫调节并举）。

本项目采用Walker256乳腺癌细胞胫骨腔内注射建立大鼠骨癌痛模型，分别观察了不同频率和频次电针治疗大鼠骨癌痛的镇痛效应差异、电针治疗骨癌痛大鼠的镇痛和调节免疫双重效应及阿片受体拮抗剂纳洛酮对电针效应的干预、电针对骨癌痛大鼠中枢和外周阿片系统的干预以及内/外源性阿片肽对骨癌痛大鼠细胞免疫功能的影响，旨在优化电针治疗骨癌痛的刺激参数，明确电针抗大鼠骨癌痛的治疗优势效应，进而从阿片系统调控角度深入揭示电针抗大鼠骨癌痛和调节细胞免疫的内在作用机制。现有研究结果提示：（1）单次电针治疗大鼠骨癌痛有良好的即刻镇痛作用，但与电针频率相关性不大；重复多次电针治疗大鼠骨癌痛的即刻镇痛效应明显，不同频率（2Hz、100Hz和2/100Hz）和频次（每日一次和隔日一次）间镇痛效应无差异；电针治疗骨癌痛大鼠的镇痛后效应不显著。（2）电针治疗大鼠骨癌痛具有镇痛和免疫调节双重功效，虽镇痛作用不如吗啡，但存在明显的细胞免疫增强效应。（3）电针可不同程度地提高骨癌痛大鼠DRG中不同类型阿片受体的阳性细胞和mRNA表达，尤以MOR和KOR为主；电针虽对外周血中阿片肽含量干预不明显，但可显著提高外周阿片前体POMC和PDYN的mRNA表达。（4）EA可显著提高脾脏T淋巴细胞增殖能力和血浆IL-2含量，但该效应可被腹腔注射纳洛酮翻转，提示外周阿片系统介导电针抗骨癌痛，且部分参与了电针的外周免疫调节作用。（5）选用鼠源β-内啡肽和吗啡分别作为大鼠内源性和外源性阿片肽，观察腹腔注射鼠源β-内啡肽和吗啡对骨癌痛大鼠细胞免疫功能的影响，结果提示不同来源的阿片肽对骨癌痛大鼠细胞免疫功能干预作用各异：内源性阿片肽可提高细胞免疫，而外源性阿片肽却无此效应。本项目研究结果部分阐释了电针治疗骨癌痛的潜在优势及其阿片调控机制，为针灸疗法应用于癌性疼痛的治疗提供了科学的研究依据，为进一步推动针灸作为绿色辅助疗法在临床癌性疼痛治疗中的广泛应用奠定基础。