Nrf2核转位调控人黑素细胞生物学行为的研究

白癜风是由于表皮黑素细胞缺失引起的色素障碍性皮肤病，导致黑素细胞缺失的机制不明确，这限制了临床治疗进展。氧化应激对黑素细胞的损伤引起关注，而且抗氧化治疗由于效果显著已成为白癜风治疗新策略。我们前期研究发现抗氧化重要调控因子Nrf2在白癜风患者皮损处存在核转位异常，结合Nrf2核转位对细胞抗氧化能力的调控作用及氧化应激对黑素细胞的潜在影响，我们推测Nrf2核转位很可能调控人黑素细胞的生物学行为，进而影响其缺失。为验证这一假设，本项目拟采用重叠延伸PCR获得Nrf2核定位信号突变型序列，构建带增强型绿色荧光蛋白的野生型和突变型Nrf2重组质粒，并转染人黑素细胞，结合氧化应激源（H2O2）和抗氧化剂（tBHQ）处理，分析Nrf2野生型和突变型发生核转位的差异及其对黑素细胞的迁移、分化和存活等生物学行为的影响。本研究可望从一个全新的角度理解黑素细胞缺失的机制，并为筛选白癜风抗氧化治疗药物提供依据。

白癜风是由于表皮黑素细胞缺失引起的色素障碍性皮肤病，导致黑素细胞缺失的机制不明确，氧化应激对黑素细胞的损伤引起关注。作为抗氧化基因的重要调控因子Nrf2，其表达水平及定位直接影响细胞的抗氧化能力。本研究通过检测白癜风患者皮损和正常供皮处组织的Nrf2表达水平及部位，表明白癜风患者皮损处存在Nrf2核转位异常，进而导致了患者皮损处疱液中MDA表达升高，SOD和CAT表达下降，使患者皮损处于氧化抗氧化失衡状态；为了明确Nrf2核转位是否对人黑素细胞的生物学行为的影响，本研究构建了野生型和核转位序列缺失型质粒，转染人黑素细胞，结合氧化应激源（H2O2）和抗氧化剂（tBHQ）处理，观察到Nrf2的核转位序列缺失可以降低细胞抗氧化能力，细胞活性，酪氨酸酶活性，促进黑素细胞的凋亡，即使经过tBHQ预处理也不能改变这些影响。而野生型Nrf2转染细胞的结果与其相反。表明Nrf2的核转位序列缺失对黑素细胞的存活，凋亡及酪氨酸酶活性有重要影响。本研究提示Nrf2核转位异常导致黑素细胞凋亡可能是白癜风发病的原因之一，Nrf2核转位可以作为筛选白癜风抗氧化治疗药物的参考指标。