HMGB1在HBV复制和乙肝肝损伤中的作用研究

持续的病毒复制和免疫应答是乙肝治疗的难题，而DAMP分子HMGB1是近年在感染性疾病的研究中逐渐被重视的细胞因子，已有的研究发现HMGB1与多种病毒性疾病的发病机制有关。本课题组前期研究发现，HMGB1的表达量与HBV复制和肝脏损伤的严重程度相关，因此，本研究拟通过检测临床各型乙肝患者外周血和肝组织中HMGB1含量，与乙肝相关指标进行比较；并以乙肝患者肝组织为靶组织，利用ChIP-on-chip芯片技术筛选HMGB1上可能与HBV复制有关的特定基因组和调控蛋白，找出HMGB1影响HBV复制的关联点；运用RAN干扰及过表达HMGB1、transwell趋化性实验，明确HMGB1在影响HBV复制和促进免疫性肝损伤中所起的作用，进一步研究HMGB1影响HBV复制的可能作用机制；最后，在活体动物中，运用HMGB1抑制剂干扰乙肝病毒复制，缓解免疫应答性损伤，探索以HMGB1作为乙肝治疗靶点的可行性。

持续的病毒复制和免疫应答是乙肝治疗的难题，而DAMP分子HMGB1是近年在感染性疾病的研究中逐渐被重视的细胞因子。本项目主要从体内和体外实验探讨了高迁移率族蛋白B1（HMGB1）在乙型肝炎HBV复制和肝损伤中的作用及其相关分子机制。在临床试验中，检测各型乙肝患者外周血和肝组织HMGB1、sRAGE蛋白水平及HMGB1mRNA的表达，分析HMGB1与sRAGE和临床各指标的相关性，结果显示HMGB1基因和蛋白水平在乙肝患者外周血和肝组织明显升高，升高的HMGB1水平与HBV-DNA滴度和临床各指标呈正相关，并与乙肝患者病情严重程度呈正相关，表明HMGB1与乙型肝炎HBV复制及其引起的肝损伤有密切关系，是乙型肝炎HBV复制和肝损伤发病机理中一个重要的细胞因子。在细胞试验中，采用HMGB1刺激HepG2.2.15细胞，检测与HBV复制相关的指标，结果证实HMGB1能促进HepG2.2.15细胞HBV的复制。同时检测HepG2.2.15细胞中toll样通路相关信号分子及HNF4α(Hepatocyle nuclear factor 4α，HNF4α)的表达情况，初步探索HMGB1促进HBV复制的可能信号转导途径，结果显示HMGB1刺激后，toll样通路相关信号分子TLR4、MyD88、ERK、JNK、P38MAPK、NF-κB及HNF4α蛋白的表达明显增加，表明HMGB1通过TLR4介导MyD88 依赖性信号传导通路，再进一步活化下游信号分子JNK、ERK 和p38MAPK，最后诱导NF-κB 的活化，从而激活HepG2.2.15 细胞内的与HBV 病毒复制相关的转录因子HNF4α，促进HBV 复制。. 通过本项目的研究，证实HMGB1在乙肝患者外周血和肝组织中呈高表达，高表达的HMGB1一方面通过TLR4-MyD88-ERK-JNK-P38MAPK-NF-κB信号通路，激活与HBV 病毒复制相关的转录因子HNF4α，促进乙型肝炎HBV复制；另一方面，高表达的HMGB1通过招募大量的免疫细胞到达感染HBV的肝组织，进一步引起和加重肝损害。因此，HMGB1是乙型肝炎HBV复制和肝损伤发病机理中起重要作用的细胞因子，以HMGB1为靶点的治疗策略可望为临床治疗乙型肝炎提供新的思路。. 本项目共培养研究生4名，发表论文10篇，其中SCI收录论文2篇。