与禽波氏杆菌免疫相关物质的鉴定及抗原表位分析

申请者在国内开展禽波氏杆菌病研究17年的基础上，利用已分离到的不同禽源禽波氏杆菌代表株，研究与其致病性相关的毒素及与免疫原性相关的蛋白，进而分析其抗原表位。毒素提取后，通过人工培养的气管环、SPF鸡等来鉴定致病性；免疫相关蛋白提取后，免疫家兔制备免疫血清，通过ELISA检查相互免疫交叉性，再结合小白鼠、SPF鸡的免疫试验，气管环中和试验等判定不同分子大小蛋白的免疫原性及其强弱，从中筛选出具有免疫保护作用的蛋白；将此蛋白免疫Balb/c小鼠，通过杂交瘤技术制备单克隆抗体。利用不同株的单克隆抗体，通过噬菌体展示技术，从噬菌体随机肽库中筛选含有禽波氏杆菌抗原表位的短肽，经测序分析，获得具有不同抗原表位的模拟肽序列，克隆表达相应蛋白，从而为探讨禽波氏杆菌的致病机理和免疫防制机理，更好地控制禽波氏杆菌病的发生奠定基础。