Cx32和Cx43在东亚型CagA+ H.pylori始动胃癌中的作用和分子机制研究

本项目收集H.pylori（Hp）感染胃炎到胃癌多阶段患者的胃黏膜组织标本，分析并确定东亚型CagA+H.pylori（东亚型Hp）感染导致胃"炎癌链"演进过程中Cx32，Cx43表达、GJIC功能变化的规律及发生阶段，从Cx32，Cx43甲基化修饰和转录调控角度探讨东亚型Hp感染导致Cx32，Cx43表达异常的分子机制；考察东亚型Hp感染及CagA基因转染GES-1细胞与恢复Cx32，Cx43甲基化状态、特异性转录因子表达、Cx32，Cx43表达后相应指标的变化，明确Cx32, Cx43高甲基化、转录因子活性改变及Cx32，Cx43表达异常在胃癌始动中的作用；构建Hp感染蒙古沙土鼠胃癌模型，验证东亚型Hp感染及不同时段根除Hp对胃黏膜Cx32，Cx43表达和甲基化水平、转录因子表达、启动子活性、GJIC功能及胃癌发生的影响，揭示Hp干预显效的临界点和分子基础，为临床胃癌防治提供新靶点。

幽门螺杆菌（Helicobacter pylori, H.pylori）是第一类生物致癌因子，与胃癌发生密切相关。H.pylori感染导致胃癌发生一般遵循H.pylori感染→慢性非萎缩性胃炎→慢性萎缩性胃炎→肠上皮化生→异型增生→胃癌的演进过程。H.pylori是这个癌变过程中的重要始发因素，其癌变始发阶段和分子机制尚不完全清楚。本研究从临床病例、细胞模型及动物实验研究了东亚型CagA+H.pyloriri感染对胃黏膜上皮细胞Cx32，Cx43表达的影响及其在胃癌发生发展中的作用，并从Cx32，Cx43甲基化及转录调控探讨了Cx32，Cx43表达降低的机制。研究发现，H.pylori感染相关胃癌发生不同阶段中，从慢性萎缩性胃炎阶段开始Cx32，Cx43表达下降，此时可能出现GJIC功能不可逆损伤，提示H.pylori感染的根除治疗最好是在GJIC功能发生不可逆损伤之前，即在萎缩性胃炎发生之前根除H.pylori 治疗，预防胃癌发生的效果可能更佳。防止和纠正Cx32，Cx43表达下降，可能为临床胃癌防治提供新的靶点和治疗策略。H.pylori感染导致Cx32，Cx43表达下降与Cx32，Cx43启动子高甲基化及转录因子GATA-3表达上调有关，其中GATA-3在H.pylori相关胃“炎-癌”链演进过程中呈逐渐升高趋势，并与Cx32，Cx43表达呈负相关；通过RNA干扰技术及双荧光素酶报告验证GATA-3负调控Cx32，Cx43表达，可能在H.pylori感染致癌中起关键作用。转录因子GATA-3在T细胞分化生长中起决定性作用，目前尚未见GATA-3对上皮细胞癌变及生物学功能如细胞增殖、迁移、周期、炎症相关信号通路影响的报道。本课题组目前正在利用胃黏膜上皮细胞模型，探索GATA-3介导的潜在信号通路，拟进一步阐明GATA-3在H.pylori相关性胃炎和胃癌中的作用及机制。