支气管哮喘中性粒细胞粘附迁移机制及KLF2在其中的调控作用研究

Asthma is a kind of inflammational disease,neutrophils is one of the cells contributed to inflammation of asthma,especialy in severe asthma.Although apoposis delay is thought to be one of reasons that increas numbers of neutrophils in airway of asthma,is there a possibility that neutrophils in the blood migrate more to lung which lead to increasing numbers of neutrophils in airway of asthma？As a transcriptional factor,KLF2 regulate the migration of lymphocytes,we speculate KLF2 also regulate adhension and migration of neutrophils.To authenticate this hypothesis ,we will regulate KLF2 expression and apply Cell Adhension assay、Realtime-PCR、Western-blot、 EMSA、ChIP and immunohistochemistry on levels of clinical collection、animal model and cultured cells.This research will complete the pathogenesis of asthma,also can provid a new theory to prevent and cure of asthma.

支气管哮喘的本质是慢性气道炎症,中性粒细胞（PMN）是其效应细胞之一，而在严重类型哮喘中，中性粒细胞作为主要的效应细胞参与疾病发生过程。虽然近来有人认为中性粒细胞凋亡延迟是哮喘气道内中性粒细胞增多的机制，但外周血中性粒细胞向肺部迁移增加是否也是哮喘发生发展的一个因素？KLF2作为一种转录因子，参与淋巴细胞迁移，而哮喘中性粒细胞内亦有KLF2的表达，推测KLF2可能参与哮喘PMN粘附迁移的调控，从而参与哮喘的发生发展。为证实这一假说，我们拟通过干预KLF2基因表达水平，借助细胞粘附实验、RT-PCR、Western-blot、EMSA、ChIP、免疫组化染色等实验方法，从临床标本、动物模型和培养细胞三个层面，探讨KLF2对哮喘PMN粘附迁移的影响及调控通路。本研究能为哮喘气道炎症机制提供新的理论依据，为哮喘防治提供新的思路。

我们借助慢病毒转染、Q-PCR、Western-blot、ELISA、ChIP、免疫组化染色、细胞黏附迁移实验、流式细胞检测术、双荧光素酶报告基因等实验技术方法，在临床、动物及细胞实验3个层面，研究哮喘KLF2表达变化与中性粒细胞粘附迁移之间的关系，发现KLF2可以调控S1PR1、CXCR1、CXCR2、L-selectin的表达，进而影响哮喘中性粒细胞的黏附迁移，而中性粒细胞是突发致命性哮喘、哮喘持续状态、糖皮质激素抵抗哮喘、重度哮喘重要效应细胞，中性粒细胞在上述类型哮喘发病及疾病进展具有重要作用。本研究表明KLF2在哮喘发病中具有重要作用，分子靶向干预KLF2将会成为哮喘分子治疗的潜在重要方向。