XAF1基因逆转肝肿瘤细胞对TRAIL耐药的作用和机制研究

XAF1是一个新发现的候选肿瘤抑制基因。我们的前期研究证实，应用腺病毒载体介导XAF1基因感染肝癌细胞，在体内和体外实验中均能抑制肝癌细胞的增殖和诱导其凋亡，并伴随内、外源性凋亡相关蛋白的裂解和释放；显著抑制裸鼠移植瘤血管生成；进一步研究发现，XAF1能够显著上调死亡受体DR4和DR5基因的表达的表达；将Ad5/F35-XAF1病毒和重组人TRAIL蛋白共同作用于TRAIL耐药性肝癌细胞株，发现XAF1能逆转肝癌细胞对TRAIL的耐药。在此基础上，我们拟进一步对XAF1基因逆转肝癌细胞对TRAIL耐药的作用进行深入研究，阐明XAF1基因逆转TRAIL耐药而增强其抗肿瘤的作用机制。因此，本项目的完成有助于为肝癌的肿瘤耐药提供一个的新的治疗方法和策略。

XAF1是XIAP的结合蛋白，是一种新型肿瘤抑制基因。本课题在以往研究的基础上，通过研究XAF1基因可增强TRAIL对肝肿瘤细胞诱导凋亡的敏感性及其相关机制，探讨XAF1治疗肝脏肿瘤的可行性以及在逆转肝肿瘤对TRAIL耐药中的作用。结果显示：无论在TRAIL敏感和TRAIL相对耐药的人肝癌细胞株中，重组腺病毒Ad5/F35-XAF1联合TRAIL均可明显增加肿瘤细胞的凋亡、抑制肝癌细胞的增殖，明显增加内、外源性凋亡通路中多种相关蛋白的裂解和表达，并上调死亡受体DR4、DR5的表达，下调凋亡抑制蛋白Bcl-2和XIAP以及血管内皮生长因子VEGF的表达。运用RNA干扰技术下调DR5在肝癌细胞SMMC-7721和Hep3B中的表达可减弱XAF1诱导肿瘤细胞凋亡的作用。在体内实验中，应用裸鼠的皮下移植瘤模型，发现Ad5/F35-XAF1病毒与TRAIL联合作用，较两者单独作用相比，均可显著抑制人肝癌细胞株SMMC-7721裸鼠移植瘤的生长。结果表明，XAF1可能通过上调TRAIL受体DR4和DR5的表达使TRAIL增加诱导凋亡作用的能力，从而克服肝癌细胞对TRAIL的耐受，并抑制肿瘤血管生成。因此，本课题结果初步阐明了XAF1逆转肝癌细胞对TRAIL耐受的机制，为XAF1基因联合TRAIL治疗肝肿瘤提供有力的实验依据。