从Notch信号通路探讨逍遥散对抑郁模型大鼠海马神经再生的影响

Nerve regeneration now receives much attention in the field of depression. Many studies have investigated the anti-depression effect of Xiaoyaosan Decoction. However, there has been relatively little evidence about the action mechanism of Xiaoyaosan Decoction on nerve regeneration. Based on our previous work, this project proposes a hypothesis that Xiaoyaosan Decoction can treat depression by regulating nerve regeneration through Notch signal pathway. A total of 60 male rats are randomly divided into control group, model group, Xiaoyaosan group and fluoxetine group. Rats in experimental groups suffer from immobilization stress for 21days. The rat model is tested as the model of syndrome of stagnation of live qi and spleen deficiency by animal characterization, bodyweight, food intake, open field test and sucrose preference test. Immunofluorescence is used to detect BrdU/DCX and BrdU/NeuN positive cell number. And Western blot and RT-PCR are used to detect the change of Notch signal pathway. By investigating the effect of Xiaoyaosan Decoction on nerve regeneration in rats with depression from Notch signal pathway, we hope to provide some scientific evidences for Xiaoyaosan Decoction against depression .

近年来中枢神经再生在抑郁的发病机制中备受关注。目前，从分子水平对逍遥散的抗抑郁机理进行了大量研究，但逍遥散对海马神经再生的作用机制尚不明确。结合前期工作基础，本课题提出“逍遥散防治抑郁症的作用机理可能是通过Notch信号通路增强了海马区神经再生”的假说。拟研究：（1）采用21天慢性束缚应激方法制作肝郁脾虚抑郁症大鼠模型，通过观察大鼠的宏观表征、体质量、摄食量、旷场实验、新环境抑制进食实验、糖水消耗实验对模型进行评价；（2）以免疫荧光双标法检测大鼠海马BrdU/DCX、BrdU/NeuN阳性细胞数目；（3）采用蛋白免疫印迹法和实时荧光定量PCR法，分别检测大鼠海马Notch信号通路相关蛋白和基因的表达情况。本研究将从Notch信号通路探索逍遥散对肝郁脾虚抑郁症大鼠海马神经再生的影响，为中医药防治抑郁症提供科学依据。

1.研究背景.近年来中枢神经再生在抑郁的发病机制中备受关注。目前，从分子水平对逍遥散的抗抑郁机理进行了大量研究，但逍遥散对海马神经再生的作用机制尚不明确。结合前期工作基础，本课题提出“逍遥散防治抑郁症的作用机理可能是通过Notch信号通路增强了海马区神经再生”的假说。.2.主要研究内容.采用21天慢性束缚应激方法制作肝郁脾虚证大鼠模型，通过观察大鼠的宏观表征、体质量、摄食量、旷场实验、新环境抑制摄食实验、糖水消耗实验进行模型评价。免疫组化和免疫荧光双标法检测大鼠海马BrdU、BrdU/DCX、BrdU/NeuN阳性细胞数目，以观察各组大鼠神经再生的情况；采用蛋白免疫印迹法和实时荧光定量PCR法，分别检测大鼠海马Notch信号通路相关蛋白和基因的表达情况。.3.重要结果及关键数据.（1）利用慢性束缚方法造模，成功复制出大鼠肝郁脾虚证模型。逍遥散能够改善大鼠行为学变化，增加大鼠体重、摄食量、糖水消耗率、旷场实验活动能力，缩短大鼠新环境摄食潜伏期等。.（2）逍遥散可以增加海马区Brdu阳性细胞数目、BrdU/DCX双标阳性细胞数目，促进海马区神经再生。.（3）逍遥散可以调节Notch信号通路中NICD、Notch1、Notch3、Notch4、PS1、HES1的蛋白表达和基因表达水平。逍遥散抗抑郁机理可能是通过干预Notch信号通路增强了海马区神经再生实现的。.4.科学意义.应激导致抑郁的发生与应激降低生物体脑内神经再生密切相关。逍遥散可以通过调节Notch信号通路增强慢性应激状态下大鼠海马神经元再生功能，具有神经保护和促进神经功能恢复的作用。本研究为临床应用逍遥散防治抑郁症提供了科学依据。