单环刺螠硫化物代谢关键基因的分离鉴定和功能分析

硫化物是近岸和养殖池塘中常见的一类有毒物质，一般认为对有氧生物可产生毒害。我们的研究发现，我国沿海分布的单环刺螠具有耐受硫化物毒性的特性，其体内存在对硫化物的有氧解毒和无氧代谢过程。然而对刺螠动物在硫化物极端生境中硫代谢的分子机制研究国内外尚属空白。本项目拟采用抑制消减杂交和基因芯片技术，结合不同浓度硫化物处理，筛选和克隆硫代谢关键基因，分析硫化物氧化解毒关键基因SQR和AOX及其他关键基因的全长cDNA序列特征；采用real-time PCR、原位杂交、异位蛋白表达和pull down技术研究这些关键基因的表达和功能。确定单环刺螠体内存在SQR和AOX两条氧化解毒途径；给出SQR和AOX表达动力学参数；研究有望获得一些与硫化物代谢相关的已知和未知基因，并初步明确部分关键基因的功能，为构建单环刺螠成为未来近海硫化物代谢研究的模式生物、更好地了解和研究真核生物硫化物代谢的分子机制提供依据。