基于仿生酶解技术的抗肿瘤活性成分天龙寡肽的研究

天龙及其制剂在临床上广泛用于各种肿瘤的治疗，疗效确切，但天龙的抗肿瘤物质基础依然不明确。现代消化理论认为蛋白多肽类物质口服后，经胃肠道酶解转化成寡肽才被吸收，据此提出假说：天龙口服后经消化道酶解并吸收的寡肽类物质，是其抗肿瘤活性的物质基础。本课题组前期研究发现，采用模拟人体消化过程的仿生酶解技术制备的天龙寡肽与天龙生药原粉及其水提物相比，具有更强的抗肿瘤活性。有必要在此基础上对天龙寡肽进一步的分离，明确其有效成分。本研究以仿生酶解技术制备天龙寡肽，拟以动物体内抗肿瘤活性跟踪考察的方式，结合葡聚糖凝胶、离子交换树脂、HPLC、CE、HPLC-MS、CE-MS等技术分离天龙寡肽中的活性单体成分；采用飞行质谱、氨基酸测序仪对其结构进行确证；并对其抗肿瘤活性进行研究；以期发现天龙寡肽中的抗肿瘤活性成分，弥补了从肽库筛选活性寡肽的工作量大、盲目性等不足，为寻找动物药生物活性物质提供一个新的方向。

本项目以仿生酶解技术制备天龙寡肽，以动物体内抗肿瘤活性跟踪考察的方式，结合葡聚糖凝胶、离子交换树脂、HPLC、CE、HPLC-MS等技术分离天龙寡肽中的活性单体成分；采用飞行质谱、氨基酸测序仪对其结构进行确证，并对其抗肿瘤活性进行研究，弥补了从肽库筛选活性寡肽的工作量大、盲目性等不足，为寻找动物药生物活性物质提供一个新的方向。项目通过三年研究，已完成项目计划内容，分离并确证了天龙寡肽的结构，而且通过合成手段得到了天龙寡肽成分，并通过体外细胞实验及体内药效学实验进行了活性筛选。此外，在对分离所得不同肽段进行抗肿瘤活性筛选时，发现天龙中一非肽类物质同样具有较强的抗肿瘤活性，初步认为是天龙总核苷，可能为天龙抗肿瘤作用的另一物质基础，值得深入研究。