利用MAP65转基因拟南芥研究微管骨架在气孔运动中的动态变化

本研究旨在揭示微管骨架动态变化（microtubule dynamics）在气孔运动中的作用，以及它参与调节气孔开关的可能机理。从目前国际上该领域关于"植物微管是否参与气孔运动功能"这一争论热点入手，采用分子生物学手段，构建绿色荧光蛋白GFP与一种拟南芥微管结合蛋白MAP65融合的荧光探针(GFP: MAP65，并将该融合基因分别连接到35S组成型启动子和保卫细胞高效表达启动子CER2上)，检测、筛选转基因植株，活体条件下，激光共聚焦扫描显微镜直接观察气孔运动中保卫细胞微管骨架的动态行为，为植物微管参与气孔运动提供最有力的证据。同时，用药理学实验，将微管特异性抑制剂（如APM）与气孔运动信号通路中相关因子的特异性药物（如蛋白激酶抑制剂、蛋白磷酸酯酶抑制剂、质子泵激活剂）相配合，探讨细胞骨架在气孔运动信号通路中的位置,进一步完善气孔运动的调控机理，确立微管骨架在气孔运动信息传递途径中的地位。