自身免疫性肝炎中CYP2D6抗原表位识别的研究

本项目在国内首次以抗CYP2D6标准抗体为免疫探针，采用噬斑原位印迹法，筛选出人肝CYP2D6cDNA表达文库，培养扩增后，构建测序质粒，表达融合蛋白，采用Western Blot方法对各类肝炎病人的血清进行免疫检测。本项目首次证明了在中国的肝炎患者中存在抗CYP2D6抗体阳性的自身免疫性肝炎，阳性率为3.5%。将来源于确诊为自身免疫性肝炎患者的肝活检标本，分离出淋巴细胞，经流式细胞术分析表明主要以CD4、CD8为主，以细胞增殖反应，证明了这些浸润的T细胞对CYP2D6有一定的特异性。以免疫荧光法观察到在自身免疫性肝炎中约30%患者的肝细胞膜表达CYP2D6自身抗原。提示这些分子有可能成为自身抗体的攻击目标。这对加深自身免疫性肝炎发病认识提供实验依据。