牛膝多肽促进周围神经损伤修复的应用基础研究

周围神经损伤的治疗仍是临床的一个难题，损伤后除借助于手术修复，更多要依靠药物的治疗，但目前仍缺乏理想的治疗药物。寻找在治疗周围神经损伤中具有自主知识产权的传统中药有效成份具有重要意义。本课题采用自主研制的牛膝多肽(专利号CN 101270147A)促进大鼠腓总神经再生，旨在从评价再生的三个重要环节(神经、靶器官和中枢)揭示牛膝多肽促周围神经损伤的修复。研究内容一：观察牛膝多肽对腓总神经横断的大鼠功能恢复，足迹、温痛觉、电生理学方法检测运动和感觉功能恢复；二：免疫组织化学方法和电镜技术，检测再生的腓总神经、胫前肌、中枢运动和感觉神经元的形态学和显微结构的变化。三： Realtime-PCR和Western Blot法分析周围神经再生相关基因在腓总神经和中枢神经元的mRNA和蛋白表达的变化，揭示牛膝多肽促进神经再生的作用机制。本课题的开展将为临床周围神经损伤疾病的治疗提供新的启迪。

药物治疗是促进外周神经再生和功能恢复的主要治疗手段。前期研究发现牛膝多肽（ABPP）能够促进挤压伤的坐骨神经以及其支配的肌肉组织的再生和功能的恢复。本课题进一步研究ABPP腹腔给药对大鼠腓总神经横断缝合和坐骨神经挤压伤模型的修复效应。在大鼠腓总神经横断缝合模型中以临床用药弥可保作阳性对照，通过测定展趾功能指数TSF、电生理学CMAP、NAP波幅和NCV、再生神经纤维髓鞘厚度和板层数、胫前肌湿重比和肌纤维横截面积等发现，ABPP（1- 9 mg/kg）能促进横断缝合神经的形态学修复和功能再生，效果明显优于生理盐水组，接近弥可保组，且ABPP组内存在剂量-效应关系。研究进一步利用大鼠坐骨神经挤压伤模型以神经生长因子（NGF）作为阳性对照，足迹实验、电生理学测定和形态学分析提示，ABPP（9 mg/kg）的修复效果明显优于生理盐水组，接近NGF组。实时定量PCR检测挤压伤段坐骨神经和术侧L4-6背根神经节中相关神经生长因子（NGF、BDNF、CNTF、TrkA、TrkB）的mRNA表达量，ABPP组明显高于生理盐水组，接近NGF组。上述研究结果表明，植物多肽类ABPP能有效改善外周神经横断和挤压伤导致的神经病变，可能是通过调节神经营养因子的表达和促进脊髓和背根节神经元的存活。