肿瘤免疫耐受中CD11b+Gr-1+髓系抑制性细胞在脾脏聚集的分子机制及其意义

CD11b+Gr-1+髓系抑制性细胞（MDSC）能够促进肿瘤的免疫逃逸，肿瘤晚期脾脏呈免疫耐受状态，伴随MDSC在脾脏内的大量聚集。趋化因子是否在其中起重要作用，目前仍不清楚。本研究通过建立H22原位移植性小鼠肝癌模型，用蛋白质芯片筛选荷瘤早期、中期、晚期脾脏中高表达的趋化因子，进一步用体外趋化实验筛选出有功能的靶趋化因子，并用ELISA、western blot证明靶趋化因子在脾脏中特征性高表达。随后用靶趋化因子的siRNA体内注射，降低靶趋化因子的水平，观察在荷瘤早期、中期、晚期脾脏、肿瘤组织中MDSC数量的变化，NK细胞杀伤活性、T细胞增殖能力、Treg百分比的变化以及小鼠存活时间、肿瘤生长情况。以期降低脾脏MDSC的数量，打破肿瘤免疫耐受，为荷瘤晚期MDSC在脾脏内大量聚集以及脾脏免疫耐受状态的形成提供可能机制。

髓系抑制性细胞（MDSC）正常情况下存在于骨髓中，脾脏中比例很低，并且不具有免疫抑制功能；而在荷瘤机体脾脏和肿瘤组织中大量扩增，并且发挥免疫抑制作用，促进肿瘤的生长。目前大量的研究集中在肿瘤中MDSC的扩增机制，而对脾脏中MDSC的聚集机制研究甚少。由于脾脏是机体最大的免疫器官，是免疫细胞居住和产生应答的重要场所，因此脾脏中MDSC的聚集必将对其它免疫细胞产生影响，从而影响整个机体的免疫应答，所以研究脾脏中MDSC的聚集机制很有必要。为此，本课题建立了小鼠H22原位移植性肝癌模型，观察了荷瘤不同时期脾重量、脾指数、脾脏的病理学变化，流式细胞术检测脾脏MDSC随着肿瘤的进展，比例逐渐升高。免疫荧光结果提示MDSC位于脾脏的红髓和边缘区。免疫磁珠分选出荷瘤脾脏中的MDSC，体外实验证明了MDSC可以抑制脾细胞的活化增殖。用蛋白芯片的方法检测了荷瘤不同时期脾组织的蛋白差异表达，发现了与MDSC增殖活化相关的因子，目前正在验证中。阶段性结果已被收录在Journal of Gastroenterology and Hepatology和HPB杂志上。