Ghrelin信号介导的四逆汤抗心力衰竭作用的"君臣佐使"配伍机制研究

本课题组数十年的工作显示：四逆汤可主要通过增强心功能、促进心肌能量代谢、调节机体免疫抑制炎症损伤等三方面起到防治心力衰竭的作用。此外，我们通过拆方研究表明在改善心功能及血流动力学指标方面复方明显优于单味，但是组成复方的附子、干姜、甘草等单味在四逆汤的"君臣佐使"配伍中的作用体现及分子机制仍不十分清楚。我们上一个国家自然科学基金课题中观察到一种新的脑肠肽－- - ghrelin对心衰有良好的防治作用，且最近的研究已发现四逆汤能显著激发内源性ghrelin释放来发挥抗心衰作用。Ghrelin在四逆汤抗心衰效应中是否是一个枢纽性的中介物质仍值得探讨。因此，在我们已有工作的基础上，多角度观察四逆汤抗心衰的作用及其ghrelin分子机制，不仅为心衰研究方面获得前沿性的理论信息， 还为复方中药抗心衰的独特的整体调节作用及其"君臣佐使"配伍原则找到新的实验依据。

背景与目的：本课题组以前的研究工作表明中药复方四逆汤具有防治心力衰竭的作用，拆方研究表明在改善心功能方面复方疗效明显优于附子、干姜及甘草单味药；脑肠肽Ghrelin，生长激素受体内源性配体，也展示出与四逆汤相似的多重心血管保护作用。故本项目拟探讨ghrelin/GHSR分子信号机制是否介导了四逆汤的"君臣佐使"复方配伍机理及抗心衰作用。方法：首先，我们在大鼠体内检测了四逆汤中药配方颗粒混合溶液的毒理作用；其次, 多角度探讨了四逆汤中药配方颗粒混合溶液抗大鼠阿霉素性心衰的有效性及内源性ghrelin分子调动机制，并且通过心功能、能量代谢、免疫调理、GHSR受体分子表达等指标变化的差异分析了各单味及复方的药理活性效应构成模式。 最后，用离体实验研究四逆汤有效成分保护心肌的分子信号机制。结果：四逆汤中药配方颗粒混合液安全低毒；单味药在改善心功能、能量代谢、免疫调理等方面有显著差异，但是复方的协同效应好；离体实验研究表明君药附子与臣药干姜有效成分去甲乌药碱联合6-姜酚可以通过抗氧化应激及抑制细胞凋亡来保护心肌细胞，且该效应与调节Ghrelin/GHSR信号通路密切相关。结论：四逆汤抗心衰作用、复方配伍规律与ghrelin/GHSR信号中介的“自稳态” 平衡机制密切相关，复方颗粒能否代替中药饮片及内源性Ghrelin在四逆汤抗心衰效应中可能是一个枢纽性的调节肽仍值得进一步探讨。