胃癌前哨淋巴结淋巴管生成及转移的表观遗传调控研究

DNA去甲基化激活的某些基因表达涉及肿瘤演进及淋巴转移。最新研究表明，Aza-dC 诱导的VEGF-C去甲基化活化VEGF-CmRNA表达，可能参与淋巴管生成。本研究采用BGS法进行人胃癌VEGF-A,C,D/VEGFR-2,3基因组DNA序列分析,寻找和确定影响转录的启动子CpG岛位点,分析CpG 岛位点甲基化状态与淋巴转移、LVD等临床病理因素的关系，阐明表观遗传修饰对前哨淋巴结淋巴管生成的调控作用。建立裸鼠人胃癌原位移植模型，采用qRT-PCR、Western-blot、BGS、IHC、FACS等方法，观察VEGF-A,C,D/VEGFR-2,3-SiRNA、TSA、Aza-dC 及S-adenosylmethionine不同干预方式对胃癌前哨淋巴结淋巴管生成及淋巴转移的影响，阐明表观遗传修饰调控前哨淋巴结淋巴管生成的分子机理，探索抗淋巴转移的新途径。

背景 DNA的甲基化及去甲基化可调节某些基因的表达,涉及肿瘤演进及淋巴转移。方法 BGS法检测肿瘤、正常胃组织、胃癌细胞株中VEGF-C及相关因子的甲基化情况，观察甲基化、去甲基化药物、RNAi技术对胃癌的体内外影响。 结果 VEGF-C的去甲基化过程存在于胃癌的发生及发展过程，甲基化药物可促进胃癌细胞甲基化，抑制VEGF-C的表达，促进细胞凋亡，抑制肿瘤的体内生长及转移；VEGF-C-shRNA可抑制胃癌细胞生长及迁移，抑制肿瘤内功能淋巴管的生长；发现提示胃癌淋巴转移的相关因子。结论 甲基化是调节淋巴管生成相关因子表达的重要机制，促进VEGF-C的甲基化可以抑制胃癌生长及转移；RNAi是抑制胃癌的重要手段。 科学意义 阐述了胃癌发生、演进的新机制，同时为胃癌的治疗提供了新的有效手段。