淋巴结中LEC分泌CCL2促进舌癌细胞定居与增殖的分子机制研究

舌癌患者淋巴道转移率约为60％，一旦出现淋巴道转移，其5年生存率将显著降低。因此控制淋巴道播散是提高生存率的关键。癌细胞在淋巴结中定居增殖是淋巴道转移形成的一个关键步骤，因此本课题以淋巴结中LEC与舌癌细胞的相互作用作为研究方向，以期阐明LEC对舌癌细胞在淋巴结中定居增殖的影响机制。我们前期研究发现，淋巴结中LEC能够被舌癌细胞激活，分泌多种趋化因子，可能对癌细胞生物学行为产生影响。其中CCL2表达最高，对癌细胞的作用最显著，因此本课题以LEC分泌的CCL2作为突破口，研究该因子对舌癌细胞迁移、运动、增殖等行为的影响。本研究应用多种现代分子生物学技术，突出分子机制的探索，探讨CCL2对癌细胞运动、增殖相关分子－Rho、Rac、PI3K/Akt的影响，并且从CCL2受体角度，发现与它们相关的上游分子，更好解释淋巴结中LEC作用于舌癌细胞的分子途径，对分子靶向治疗具有重要理论意义。

淋巴结转移是舌癌患者预后的关键因素，舌癌的淋巴道转移机制是目前基础研究的焦点。本研究从淋巴结LEC分泌CCL2为切入点，研究淋巴窦内皮细胞与舌癌细胞相互作用对舌癌细胞淋巴结中定居和增殖的影响。研究发现：CCL2能够促进LNMTca8113细胞骨架重组及RhoAGTPase和Rac1GTPase活性，通过剂量依赖方式促进舌癌细胞迁移运动。siRNA阻断RhoA和Rac1后，有效的抑制了CCL2对细胞骨架及细胞迁移运动的影响；CCL2能够促进LNMTca8113的增殖，阻断PI3K有效的抑制了细胞增殖及AKT磷酸化；siRNA阻断LNMTca8113中CCR10表达，可以抑制LNMTca8113的增殖及迁移运动；对LNMTca8113中CCR10下游分子进行免疫共沉淀，发现CCL2可以促进多个细胞骨架蛋白的表达。本研究证明CCl2能够介导舌癌与淋巴窦内皮细胞的作用，淋巴窦LEC通过分泌CCL2能够促进舌癌细胞的增殖和迁移，RhoA和Rac1是CCL2促进细胞骨架重组和迁移的关键分子，PI3K/AKT是CCL2促进舌癌细胞增殖的关键分子；CCL2/CCR10也是CCL2发挥作用的一条途径，CCL2通过CCR10能够激活舌癌细胞中的细胞骨架蛋白。本研究为阻断LEC分泌CCL2治疗舌癌淋巴道转移提供了理论依据。