spindlin1与Aurora-A激酶相互作用的研究

卵巢癌死亡率居高不下，对其发生与发展分子机制的探讨具有重要意义。spindlin1是我们从卵巢癌细胞中克隆并命名的新的肿瘤相关核蛋白。前期研究表明spindlin1在细胞有丝分裂周期中呈动态分布，可以引起肿瘤细胞G2/M期阻滞以及染色体不稳定等现象，这与在肿瘤中扮演重要角色的Aurora-A激酶非常相似，提示两者之间可能存在一定关系。我们利用GST-pulldown，IP以及候选磷酸化位点突变等方法初步证实了两者之间存在一定的相互作用。本研究目的旨在进一步验证spindlin1与Aurora-A之间的相互作用，明确磷酸化位点，研究Aurora-A激酶的磷酸化作用在spindlin1功能发挥中所扮演的角色。以上研究有助于spindlin1在肿瘤中作用机制的明确和卵巢癌发生分子机理的阐明，并有可能为临床肿瘤药物的开发提供新的作用靶点。

Spindlin1属于Spin/Ssty基因家族，是本研究室从人类卵巢癌标本中分离克隆获得并命名的新基因。我们已在前期研究中发现Spindlin1在纺锤体组装及染色质稳定中发挥重要作用，并对肿瘤发生发展具有重要影响。然而，Spindlin1的作用机制尚不明确。在本研究中，我们首先验证了Spindlin1在肿瘤标本中表达上调，外源表达Spindlin1能够促进肿瘤细胞增殖，并促进Wnt/TCF-4信号通路。我们随后证明了Spindlin1中Ser84和Ser99是促进Wnt/TCF-4信号通路活性的关键性位点。将这两个位点突变后，Spindlin1对Wnt/TCF-4信号通路活性及肿瘤生长的促进作用减弱。进一步研究发现，Aurora-A激酶能够与Spindlin1相互作用，并且磷酸化Spindlin1的关键功能位点Ser84和Ser99，证明Spindlin1的磷酸化与其癌基因功能密切相关。综上所述，Spindlin1是Aurora-A激酶新的作用底物，磷酸化的Spindlin1通过Wnt/TCF-4信号通路参与肿瘤生长的促进作用。