果蝇硒蛋白G-rich的细胞定位、拓扑结构和分子功能研究

硒在人体内具有预防和控制癌症、心血管病、延缓衰老、提高免疫力等功能。硒蛋白是生物体内一类能在翻译过程中以三个终止密码子之一的UGA作为密码子进行硒代半胱氨酸插入的具特殊编码与合成机制的蛋白质。果蝇硒蛋白G-rich和人基因同源物SelK是细胞定位和功能未知硒蛋白之一。本项目通过构建果蝇硒蛋白G-rich与Flag标签融合蛋白的表达载体，采用双重荧光免疫细胞化学法和激光共聚焦显微摄影等进行硒蛋白G-rich的细胞定位；采用微粒体制备、胰蛋白酶消化和Western blot 等方法研究拓扑结构；采用dsRNAi基因敲低和基因芯片检测技术研究基因的表型和相关基因群；通过构建大肠杆菌高效表达载体及制备特异抗体，以及免疫组织化学法研究其在胚胎不同部位、幼虫及成体不同组织特异表达。最终将在国内外首次阐明G-rich的细胞定位和分子功能，并为其基因同源物人硒蛋白SelK的研究打下坚实基础。