SLIP1/p27kip1调节细胞增殖迁移在肝癌中的意义

Among the CKIs, p27kip1 represents an inhibitor of cyclinE/CDK2 complex and plays a central role in cell proliferation, differentiation and malignant transformation. Cytoplasmic p27kip1 appears to participate in RhoA mediated cancer cell invasion. Dysfunction of p27kip1 is regulated by phosphorylation, proteasomal degradation, cellular localization. We have found that SLIP1 could bind with p27kip1, which has not been reported before. Our studies showed that SLIP1 could interact with p27kip1 in hepatocellular carcinoma. We invent to study the effects of SLIP1/p27kip1 on p27kip1 phosphorylation,proteasomal degradation and cellular localization.The results can elucidate the role of interaction between p27kip1 and SLIP1 in proliferation and migration of hepatocellular carcinoma. Furthermore, the role of SLIP1/p27kip1 in regulating cellular proliferation and migration in hepatocellular carcinoma samples and nude mouse model system will also be investigated. This study not only makes a deeper understanding of regulation mechanism of p27kip1, but also helps to demonstrated that in carcinogenesis, development and prognosis in hepatocellular carcinoma, and may provide a potential target for the development of anti-cancer therapy.

在众多CKIs中，p27kip1作为一个cyclin E/CDK2复合物的抑制剂，能够对细胞增殖，分化和恶变起主要调控作用。在肿瘤细胞胞浆中的p27kip1还具有参与RhoA介导的肿瘤侵袭能力。p27kip1功能异常主要受磷酸化修饰、蛋白降解、细胞定位的影响。我们新发现了一个能与p27kip1相互作用的分子SLIP1，初步研究证明两者的表达存在调控关系并与肝癌相关。本研究拟通过研究SLIP1/p27kip1相互作用对p27kip1的磷酸化修饰、蛋白降解、细胞定位影响，研究这种作用与肝癌细胞增殖、迁移的关系。并结合临床标本资料分析，受干预基因裸鼠模型研究，明确SLIP1/p27kip1调节细胞增殖、迁移在肝癌中的意义。本研究不但可以深入了解p27kip1的调节机制；同时将有助于理解这种机制在肝癌发生、发展和预后中的作用，为新的抗癌药物的设计提供靶点。

p27是重要的抑癌蛋白，在防止肝癌的恶性增殖和进程过程中发挥关键作用。课题组和其他研究团队均发现，肝癌进程过程中通常伴随p27的表达下降或缺失，但其机制不清楚。课题组前期研究发现，MIF4GD蛋白是一个p27的新的相互作用蛋白。因此，本课题的主要任务为阐明MIF4GD调节肝癌中p27的机制研究。.本课题研究主要在分子机制、细胞行为、体内成瘤和病理组织等层面研究MIF4GD调控p27表达和定位的机制。首先，课题组通过肝癌组织和细胞进行免疫沉淀实验明确了MIF4GD和p27的相互作用，并且通过免疫荧光分析了两者的共定位。在此过程中，课题组发现MIF4GD过表达可以导致肝癌细胞中p27的核内表达明显升高，而在正常肝细胞中无此现象。进而，课题组发现MIF4GD主要通过转录后机制调控p27的表达。过表达MIF4GD可以促进p27在肝癌细胞中的稳定性，而干扰MIF4GD可以抑制p27的稳定性。此外，课题组通过突变实验发现，MIF4GD促p27稳定性依赖于p27的T187位点磷酸化。MIF4GD可以抑制肝癌细胞的DNA合成、增殖和克隆形成能力；并且，过表达MIF4GD可以抑制肝癌细胞在体内的成瘤性。MIF4GD高表达于正常肝组织中，而在肝癌病例组织呈现明显的低表达。并且，MIF4GD的低表达和肝癌患者的不良预后程密切的关联性。.通过上述研究，课题组在多个层次证明了MIF4GD通过调控p27的核内表达，从而抑制肝癌进程的机制。本研究首次鉴定发现了MIF4GD作为新的抑癌基因，具有重要的临床诊断及潜在的治疗价值。相关研究发表于国际著名肿瘤学期刊Oncogene杂志中，获得了广泛的关注。