基于蛋白质组学的灰树花蛋白肽-硒螯合物对Caco-2细胞代谢的作用机制研究

Selenium is an essential trace element; its deficiency is seriously harmful to human health. The application of inorganic selenium supplement is limited because of its strong toxicity. Therefore, the development of organic selenium compounds with high biological activity and low toxicity becomes a research hotspot. For the purpose of changing inorganic selenium into organic selenium, the specific selenium-chelating peptide will be separated and purified from Grifola frondosa protein hydrolysate, based on previous studies, to make the Grifola frondosa protein hydrolysate-selenium chelate. The Caco-2 cell model will be established to observe the absorption characteristics of this chelate. The effect of the chelate on Caco-2 cell will be detected, and the action mechanism of Grifola frondosa protein hydrolysate-selenium chelate on Caco-2 cell’s metabolism will be revealed by iTRAQ proteomics technology. The results of this project will provide theoretical basis and technical support for the development of organic selenium nutritional supplements and functional foods.

硒是人体必需微量元素，缺硒严重危害人体健康。由于无机补硒剂毒性较强，应用受到限制，因此，开发生物活性高而且毒副作用小的有机硒化合物成为目前研究的热点。本项目在前期灰树花蛋白酶解物与硒的螯合作用初步研究基础上，分离纯化出具有螯合硒作用的特异性灰树花蛋白肽，制备灰树花蛋白肽-硒螯合物，将无机硒转化为有机硒；建立Caco-2细胞模型，研究灰树花蛋白肽-硒螯合物促硒吸收特性；应用iTRAQ蛋白质组学技术，探明灰树花蛋白肽-硒螯合物对Caco-2细胞代谢的影响，揭示灰树花蛋白肽-硒螯合物对Caco-2细胞代谢的作用机制，为开发有机硒营养补充剂与功能性食品提供理论依据和技术支持。

本项目研究食药用菌源的促矿质元素吸收多肽，旨在通过分离纯化，得到强硒螯合活性的特异性硒螯合多肽；研究灰树花蛋白肽-硒螯合物对Caco-2细胞的促硒吸收效果并研究其机理，为实际生产和应用提供科学依据。以灰树花蛋白酶解物为原料，通过超滤、凝胶色谱和高效液相色谱等分离纯化手段分离出具有强硒螯合活性的特异性硒螯合肽；制备灰树花蛋白肽-硒螯合物，将无机硒转化为有机硒；通过红外光谱、紫外光谱、X-衍射和核磁共振等技术研究多肽和硒结合位点、相互作用模式和螯合机理；建立Caco-2细胞模型，研究灰树花蛋白肽-硒螯合物促硒吸收特性；应用iTRAQ蛋白质组学技术，探究灰树花蛋白肽-硒螯合物对Caco-2细胞代谢的影响，揭示灰树花蛋白肽-硒螯合物对Caco-2细胞代谢的作用机制；并建立了HepG 2细胞模型，探究灰树花多肽-硒螯合物对HepG 2细胞的增殖抑制作用。.目前常用的补硒产品主要集中在亚硒酸钠等无机物，由于无机补硒剂毒性较强，应用受到限制，因此，开发生物活性高而且毒副作用小的有机硒化合物成为目前研究的热点，本项目为开发有机硒营养补充剂与功能性食品提供理论依据和技术支持。