补体调节CD8+ T细胞记忆的机制研究

胞内微生物感染、抗肿瘤免疫、移植排斥等重要疾病中CD8+ T细胞起着关键作用，探讨影响CD8+ T细胞记忆的因素和机制是基础免疫学的长期核心问题。我们通过经典的Listeria Monocytogenes感染模型发现，补体C3基因敲除后，记忆期抗原特异性CD8+ T细胞数量显著多于野生型小鼠，抗原致敏期耗竭补体也可显著提高记忆性CD8+ T细胞数量，表明补体是影响CD8+ T细胞记忆的重要因素。本项目拟进一步从记忆CD8+ T细胞的功能和表型方面观察补体的影响，并从补体调控的细胞因子、凋亡和抗凋亡分子、胞内转录因子方面，利用相关基因敲除小鼠、抗体阻断实验、细胞因子回输实验等从不同角度、不同时相点、正反两方面探讨和论证补体调节CD8＋T细胞记忆的机制。本项目的结果不但可深化对CD8+ T细胞记忆的认识，同时对于CD8+Ｔ细胞疫苗设计有指导意义。

抗原特异性CD8+ T细胞的收缩通常发生在感染清除以后，其对于免疫系统的自稳十分重要。尽管既往文献报道补体成分能调节CD8+ T细胞的初次应答，但是，对于补体是否调节CD8+ T细胞的收缩和记忆还没有相关的证据。本项目显示，用表达重组OVA的李斯特菌感染后，补体C3缺陷小鼠的CD8+ T细胞收缩显著的慢于野生型小鼠。用蛇毒因子缺失补体C3也发现CD8+ T细胞收缩变慢的现象，说明系统性的补体在其中发挥重要作用。骨髓嵌合实验后进行相似的感染实验也也证实了系统性补体的作用。后期记忆性CD8+T细胞的表型，C3缺陷小鼠和野生型小鼠没有显著差异。进一步的实验发现,补体C3下游的C5aR信号途径没有参与对收缩的调节。而且，补体C3调节CD8+ T细胞的收缩与抗原的持续刺激无关，也与效应性CD8+ T细胞的功能亲合力无关。然而，在应答的高峰期，C3缺陷小鼠CD8+ T细胞收缩变慢的同时伴随着KLRG1高CD127低的短期效应细胞比例的降低，并与IL-12和IFN-γ等早期感染后产生的炎症因子下降密切相关。总之，我们发现胞内菌感染后系统性的补体C3调节CD8+ T细胞的收缩，这些结果使我们从一个新的视野来了解补体的作用，并且对于高效疫苗的开发有借鉴作用。