CD40-CD40L双向信号以及CD40突变体在T细胞共刺激效应中的作用及机制

本研究在已获得正常和突变CD40单克隆抗体的基础上，构建表达正常和突变CD40转基因细胞和可溶性重组蛋白，比较正常和突变CD40分子分别与可溶性和模型CD40L亲和力的异同，并通过对正常和突变CD40分子进行二级结构分析和三级结构预测，揭示这种亲和力变化的可能机制；用表达正常和突变CD40分子的肿瘤细胞及相应的转基因细胞，激发正常外周血来源的T细胞或T细胞株,研究其对T细胞上CD40L逆向信号介导的生物学效应及分子机制，以及对T细胞共刺激作用的影响；利用激光共聚焦显微镜和免疫沉淀技术，研究三种不同的CD40三聚体形式――CD40同源三聚体（突变和正常）和CD40异源三聚体，受激发后细胞信号传递体(Signalosome)的形成方式及胞内信号转导途径、涉及的TRAFs分子及其分子机制。继而分析CD40突变体在肿瘤细胞上表达的生物学意义。