洋葱伯克霍尔德菌G63交联酶聚集体在非水相介质中的构效关系研究

交联酶聚集体是一种极具开发前景的固定化酶技术，广泛应用于手性药物拆分、抗生素生产以及生物能源合成等领域, 但是，至今交联酶聚集体非水相催化特性的变化机理尚不清楚。因此，结合印迹工程、反应工程和介质工程等新技术、新方法，研究交联酶聚集体的非水相催化机制具有非常重要的理论和现实意义。本项目拟以具有自主知识产权的洋葱伯克霍尔德菌 G63脂肪酶为研究对象，耦联"分子印迹"、"界面激活"和"介质工程"等新技术、新方法，通过运用园二色谱和核磁共振等分析技术，阐明交联酶聚集体在有机溶剂、离子液体、超临界流体及其混合介质等非水相体系中的构象变化规律及其存在特点，揭示不同调控策略对交联酶聚集体的构象变化与催化特性影响的内在关联，从而诠释其构效关系，为交联酶聚集体的催化制备工艺奠定理论基础，有利于交联酶聚集体技术在非水相体系中的生物催化和转化应用发挥更大优势。

本项目严格按照合同任务书的要求有计划有步骤地实施，经费使用合理。总体而言，课题各项指标和研究内容均已顺利完成，达到了预期研究目标，取得了较好的研究成果。完成了洋葱伯克霍尔菌脂肪酶的固态发酵制备技术及其催化制备生物柴油的应用评价；完成了交联酶聚集体（CELAs)的制备以及不同工艺参数对CLEAs超分子微观结构如颗粒大小、粒径分布和催化特性的影响；完成了分子印迹、界面激活和介质工程等调控策略耦合对脂肪酶催化特性和酶蛋白构象的影响；完成了脂肪酶在有机溶剂、离子液体、超临界流体和它们的混合介质中的活性变化和蛋白构象变化规律。通过3年的研究工作，署名该基金编号已在国外期刊上发表SCI/EI论文10篇，申请国家发明专利1项，出版专著1部，培养中高级人才2名和研究生5名。