基于胃肠道吸收环节研究藏药"佐塔"配伍复方制剂起增效解毒的物质基础和作用机理研究

"佐塔" 为藏药复方佐剂，与诸药相配，增效解毒，但是其药效物质基础和增效解毒机理属于空白。拟以"佐塔名方"药为模型药，以"佐塔与诸药相配，增效解毒"为理论基础，立足于配伍"佐塔"与否的复方成分组胃肠吸收过程，旨在利用化学指纹图谱建立"谱-效"模型和指纹图谱吸收动力学，从体外、体内两个角度综合探讨成分组整体吸收情况。通过对加"佐塔"与否不同时间点"佐塔名方"药对血清/转运液成分组的心血管、消化系统作用考察和指纹图谱的建立，采用Logistic回归建立"谱-效"模型，揭示其药/毒性物质基础；采用人工神经网络（ANN）法对比分析加"佐塔"与否"佐塔名方"药对化学成分组胃肠道吸收指纹图谱异同，应用相关系数法和聚类分析等方法降维处理数据，得到其成分组吸收动力学，揭示"佐塔名方"药对成分组吸收过程中的物质基础及"佐塔"调控作用机制，探索"佐塔""增效解毒"的药动学机制。

藏药佐塔是经水银洗炼法炮制而成的常用复方佐剂，与诸药相配具有增效、解毒的作用，其安全性和科学性一直存在争议。通过对佐塔及佐塔配伍仁青芒觉与否的系列研究，为“佐塔配伍”的科学性及安全性提供参考。结论：（1）佐塔中含有纳米颗粒或以其存在并且主要以石墨、硫和硫化汞形式存在并且含有少量的有机成分；不同来源的佐塔在物理结构和化学成分上存在一定差异；佐塔和仁青芒觉中Hg元素的总量很高，但在人工胃肠液中却很低，大部分元素的溶出部位以胃为主；（2）佐塔配伍后，仁青芒觉中士的宁和马钱子碱的含量分别降低了0.91%和8.52%，其中马钱子碱含量下降更显著；（3）石油醚可作为鉴别配伍佐塔与否的仁青芒觉的最佳极性部位；配伍佐塔可以使仁青芒觉中的有效成分向弱极性（脂溶性）方向转移；（4）仁青芒觉配伍佐塔后，安全剂量（浓度）范围内士的宁和马钱子碱的吸收程度增加，以及此二者消除速率加快，可能是佐塔对于仁青芒觉发挥增效减毒作用的机制之一；（5）仁青芒觉配伍佐塔后，马钱子碱在肝脏、肾脏、肌肉、肺脏、卵巢、心脏中的含量存在极显著性差异（p ＜0.01），空肠中存在显著性差异（p ＜0.05），附睾、睾丸、脑、皮肤、子宫中不存在显著性差异（p ＞0.05），马钱子碱的含量在肝脏、下颌下腺、脾脏、卵巢中显著增加，在肾脏、肌肉、空肠、肺脏、心脏中显著降低；士的宁含量在肝脏、肾脏、卵巢、脑、心脏中存在极显著性差异（p ＜0.01），子宫中不存在显著性差异（p ＞0.05），士的宁含量在肝脏、脾脏、卵巢中显著增加，在肾脏、肌肉、肺脏、睾丸、脑、心脏中显著降低；（6）佐塔中有效成分能够直接穿透细胞膜进入细胞器中，但在细胞核中没有发现该颗粒的存在，4个不同藏区的佐塔都有较强的降低细胞内活性氧的能力，仁青芒觉粉（未配伍佐塔）和仁青芒觉均能升高Caco-2细胞中的ROS含量，且均对细胞的安全性较其它四种佐塔高；（7）仁青芒觉丸对小鼠的最大给药量为10.7 g/kg，相当于临床给药量的939倍，仁青芒觉（未配伍佐塔）粉末对小鼠的最大给药量为10.2 g/kg，相当于临床给药量的890倍。各给药组与对照组比较无明显异常且无显著性差异，表明该两种药物均无明显急性毒性作用，且配伍佐塔与否对仁青芒觉ig小鼠的急性毒性试验影响不大；（8）仁青芒觉组在小鼠、大鼠胃粘膜的损伤模型中的保护作用显示出优于仁青芒粉（未配伍佐塔）组的趋势。