绿茶提取物EGCG抗肺癌血管生成潜在靶点HIF-1α的研究

本研究拟在前一个国家自然科学基金项目(30872944)基础上,以HIF-1α为靶点、几乎无毒副作用的绿茶提取物主要成分EGCG为研究对象，采用Western blot、Real-time RT-PCR、ELISA、免疫组织化学、基因芯片等技术和方法,探讨EGCG对肺癌血管生成的影响及其机制。.（1）拟分别用尼古丁( 吸烟因素)和HPV-16癌蛋白( 非吸烟因素)诱导建立HIF-1α过表达肺癌细胞模型和体内外血管生成模型，观察EGCG对模型中HIF-1α及其下游靶点的蛋白、mRNA表达及体内外血管生成的影响。.（2）机制探讨：EGCG对VEGF等下游基因表达的影响是否具有HIF-1α依赖性 、EGCG对HIF-1α蛋白降解和合成的影响及ERK1/2和PI3K/Akt信号途径在EGCG对HIF-1α表达影响中的作用。.以上问题的解决，可为EGCG的抗肺癌机制研究提供新的思路、发现新的靶点。

本研究通过分别用吸烟因素（尼古丁）和非吸烟因素（IGF-Ⅰ、HPV-16癌蛋白）诱导建立HIF-1α过表达肺癌细胞模型和体内外血管生成模型，探讨绿茶提取物主要成分EGCG对模型中HIF-1α及其下游靶点VEGF等表达和体内外血管生成的影响及其机制。结果显示：（1）EGCG可抑制尼古丁、IGF-Ⅰ和HPV-16癌蛋白分别诱导的肺癌体内外血管生成，尼古丁、IGF-Ⅰ和HPV-16癌蛋白分别诱导的肺癌体内外血管生成具有HIF-1α依赖性。（2）EGCG可通过抑制尼古丁诱导的 HIF-1α和COX-2蛋白表达、VEGF蛋白分泌、Akt和ERK1/2 激活，并促进 P53蛋白表达，从而抑制尼古丁诱导的肺癌血管生成。（3）EGCG可通过抑制IGF-Ⅰ诱导的HIF-1α蛋白堆积及VEGF蛋白分泌、VEGF mRNA表达，从而抑制IGF-Ⅰ诱导的肺癌血管生成。（4）EGCG可通过抑制HPV-16癌蛋白诱导的HIF-1α蛋白堆积及具有HIF-1α依赖性的VEGF、IL-8、CD31的表达和Akt的活化，从而抑制HPV-16癌蛋白诱导的肺癌血管生成。这些研究成果可为EGCG抗肺癌血管生成机制的研究提供新的思路，而且还提示HIF-1α可能是EGCG抗肺癌血管生成的潜在作用靶点。