致病性暗色真菌毒力基因的研究

我国暗色真菌感染与世界其它地区相比更为常见，可感染健康者，临床死亡率很高而引起许多学者关注。为探讨暗色真菌尤其中国致病菌株致病性毒力基因，本研究将从分析暗色真菌种系进化，形态转化机制两方面探讨。首先在暗色真菌中扩增与真菌形态转化相关的CDC42,RAS-A,RAC-A.ACTIN基因，建立多基因位点种系发生树，并与金标准LSU和SSU rDNA基因进化史比较，从进化的角度，揭示这些与形态转化相关基因的种系发生过程，阐明上述基因在致病性与非致病性暗色真菌中的进化特点及差异，从而发现其致病性基因-毒力基因。同时，用抑制消减杂交(SSH)方法比较皮炎外瓶霉从菌丝向裂殖体转化过程中基因的差异性表达，检测并鉴定形态转化特异表达基因，寻找可能的潜在毒力基因，为致命性暗色真菌感染的早期诊断，治疗提供理论依据。

研究了着色芽生菌病在干寒温带地区的主要病原菌Cladophialophora carrionii在世界分布特点。并与着色芽生菌病在热带潮湿地区致病菌Fonsecaea进行了比较。进行了多基因系统发育数和AFLP方法比较，同时分析了种内基因型，种群多样性分析，基因流及重组分析。结论是着色芽生菌病在世界上出现两次扩散，并是从非洲起源，扩散到亚洲，南美。.用等温分子扩增方法RCA,MLPA和LAMP检测着色芽生菌病病原菌Cladophialophora carrionii，及相关菌种的检测研究，研究结果显示RCA,MLPA能特异，快速，敏感检测临床Cladophialophora carrionii。与常规PCR 比较快速，特异。敏感，经济，简单，是临床实验室快速检测Cladophialophora carrionii的方法之一。.检测了来自世界各地81株Cladophialophora carrionii抗9中新型抗真菌药物，MICF分别是 itraconazole 和 posaconazole (0.063 μg/ml), terbinafine (0.125 μg/ml), isavuconazole和voriconazole (0.25 μg/ml), caspofungin (2 μg/ml), micafungin (4 μg/ml), amphotericin B (8 μg/ml) 和 fluconazole (64 μg/ml). Cladophialophora carrionii 对唑类药物敏感，是临床首选治疗着色亚生菌病的药物。