水稻条纹病毒编码的p4介导病毒侵入介体灰飞虱细胞的机制

Rice stripe disease, caused by Rice stripe virus (RSV), is one of the important rice virus diseases in southern china. RSV is transmitted by the small brown planthopper (Laodelphax striatellus) in a persistent-propagative manner. The viral nonstructural protein p4 plays a critical role in viral spread by the vector insects. However, the mechanism of entry of RSV into insect cells and the functional role of p4 during viral infection are still unknown. In this proposal, we want to use neutralizing antibody, receptor blockade to further investigate the functional role of p4 during the entry of RSV into insect cell, and combine RNAi, inhibitor and immune-EM technique to study the process of viral infection. The result will lead us to understand the molecular mechanism of viral entry, which would provide theory basis for designing efficient control disease strategies in future based on the blockage of viral entry into the body of insect vector.

由水稻条纹病毒（RSV）引起的水稻条纹叶枯病是我国南方稻区主要的虫传病毒病害。RSV由介体灰飞虱以持久性增殖型方式进行传播，其编码的p4蛋白在病毒侵入中肠上皮细胞以及后期病毒侵染消化系统中起着关键作用。但目前对于病毒如何侵入介体灰飞虱细胞以及p4在其中的作用机制仍不明确。本项目拟通过灰飞虱培养细胞体系，利用中和抗体、受体封闭技术明确p4在病毒侵入灰飞虱细胞过程中的作用，结合RNAi、抑制剂、免疫电镜等技术深入研究RSV侵入灰飞虱细胞的路径，解析RSV侵入灰飞虱细胞的机制，为建立基于阻断RSV与昆虫介体上受体结合从而干扰介体传毒的抗病策略奠定基础。

水稻条纹叶枯病是一种重要的水稻病毒病，其病原物为水稻条纹病毒（RSV），由介体昆虫灰飞虱以持久增殖型方式进行传播。灰飞虱取食RSV病株后，会在其肠道内形成一种针状结构，这种针状结构对于RSV侵入中肠上皮细胞起着关键的作用。本项目对RSV侵入中肠上皮细胞机制以及病毒蛋白在侵入过程中的作用展开研究。本项目首先利用免疫荧光技术观察灰飞虱饲毒后几种病毒蛋白在肠腔中的定位，并利用酵母双杂交技术等研究病毒编码蛋白间的相互作用，明确了RSV编码的p4蛋白对肠腔中针状结构的形成十分重要，随后利用中和抗体技术阻断p4与受体互作，同时利用化学抑制剂抑制病毒內吞，结果表明：p4在RSV侵入中肠上皮细胞中起着关键作用，是病毒侵入的关键因子，解析了病毒的侵入机制，为建立基于阻断RSV与昆虫介体上受体 结合从而干扰介体传毒的抗病策略奠定基础。此外，我们还对一种新发生的水稻病毒-水稻条纹花叶病毒的侵染循回途径进行了研究，对水稻矮缩病毒的经卵传播机制进行了解析，进一步探索了介体昆虫传毒与病毒病害发生流行间的相互关系，为病害的科学防控提供了新的思路。