针对新靶点microRNA-153治疗急性移植物抗宿主病的分子机制研究

As a major complication after hematopoietic stem cell transplantation (HSCT), acute graft-versus-host disease (aGVHD) post transplantation seriously affects the long-term survival of patients. Searching warning biomarkers and early intervention are critical to improve the outcomes of aGVHD. Elucidation of the molecular regulative mechanism that contributes to pathogenesis of aGVHD would benefit to find new intervention targets. Our previous work demonstrated that the new biomarker, microRNA-153, could predict the occurrence of aGVHD and inhibit indoleamine 2, 3-dioxygenase (IDO) which displayed an important role in inducing immune tolerance. Thus, we speculate that microRNA-153 might participate the pathopoiesis of aGVHD. However, the impact of microRNA-153 on antitumor effect is still not known. The aims of this study are: 1) to further confirm that microRNA-153 directly targets IDO and participates in the occurrence of aGVHD; 2) to prove that microRNA-153 inhibits WWOX molecule which is the key tumor suppressor in Wnt signaling pathway, activates the β-catenin signaling, and promotes the hematological malignancy progression.Finally, we could demonstrate that inhibition of microRNA-153 after HSCT would prevent the occurrence of aGVHD and play antitumor roles simultaneously.It would provide the new intervention target for aGVHD prevention, therefore impove the curative effects of transplant.

造血干细胞移植（HSCT）后严重的移植物抗宿主病(GVHD)是影响预后的重要合并症，寻找预警标记物并进行早期干预是提高急性GVHD疗效的关键，阐明参与发病的分子调控机制有利于为干预找到新靶点。我们前期工作发现新型标记物microRNA-153能预测急性GVHD的发生，并抑制发挥重要免疫耐受作用的吲哚胺2,3-双加氧酶（IDO）表达，推测其可能通过调控IDO参与急性GVHD发病，但对其抗肿瘤作用尚不明确。本项目拟通过小鼠移植/成瘤动物实验及临床队列的分析:①进一步确定microRNA-153通过靶向抑制IDO导致GVHD发病；②证明microRNA-153抑制Wnt通路中关键抑癌分子WWOX，激活β-catenin 信号而促进血液肿瘤进展。最终证实抑制microRNA-153表达在移植后可同时发挥抗GVHD和抗肿瘤作用，为临床防治GVHD提供新的干预靶标，进一步改善移植疗效。

造血干细胞移植（HSCT）后严重的移植物抗宿主病(GVHD)是影响预后的重要合并症，寻找预警标记物并进行早期干预是提高急性GVHD疗效的关键。我们前期工作发现新型标记物microRNA-153能预测急性GVHD的发生，并抑制发挥重要免疫耐受作用的吲哚胺2,3-双加氧酶（IDO）表达，为阐明其参与急性GVHD发病的机制，本研究进行了体外试验，但microRNA-153在不同的白血病细胞系中表现出的抗肿瘤作用不同，体外试验证实了microRNA-153对IDO的抑制作用，但对WWOX影响不明显，未能得到预期结果，不能继续后续动物实验。课题组围绕aGVHD生物标记物筛查及免疫机制问题后续开展了相关研究工作。CD161+ T细胞是一群近年来才被关注的固有免疫样T细胞亚群，其中有两群表达半恒定TCR的特殊亚群：半恒定自然杀伤T细胞（iNKT）和黏膜相关恒定T细胞（MAIT）。iNKT在动物模型和临床研究中被证实具有抑制aGVHD的作用，在“北京方案”移植模式中的作用还未明确。CD8+CD161hi亚群中90%以上是MAIT细胞，参与自身免疫疾病的发生，但是MAIT在Allo-HSCT中的作用还不清楚。本项目研究目标为：探究移植物中iNKT和CD8+CD161hi细胞亚群与移植后aGVHD的相关性及其重建规律，并初步探索iNKT和CD8+CD161hi细胞亚群影响aGVHD的作用机制。本研究纳入100例接受异基因造血干细胞移植的患者及健康供者。检测健康供者G-CSF动员后的骨髓和外周移植物中CD161+ T细胞亚群数量和比例，分析移植物组分和免疫重建的iNKT和CD8+CD161hi与aGVHD的相关性。结果发现：移植物组分中和移植后重建CD8+CD161hi与肠道aGVHD相关；CD8+CD161hi影响肠道aGVHD的发生机制不是通过G-CSF诱导的免疫耐受；CD8+CD161hi中发挥作用的是MAIT细胞，MAIT影响肠道aGVHD的发生；供者特征影响移植物中iNKT及其亚群的构成，对CD8+CD161hi细胞没有影响。本研究探讨了CD8+CD161hi T细胞在异基因移植中的重建规律及其对aGVHD的影响，有可能为急性GVHD提供新的临床防治策略。