核受体FXR下调载脂蛋白M表达的分子机制研究及其在动脉粥样硬化中的作用

近年研究表明:核受体FXR、载脂蛋白M（apoM）在动脉粥样硬化（AS）发生中起着重要作用，FXR调节apoM分子表达未见报道。本项目组已研究发现，活化FXR能下调HepG2细胞apoM表达。根据FXR结合靶基因的正性结合元件或负性结合元件激活或抑制靶基因的活性，提出FXR与apoM基因启动子区的负性结合元件结合下调apoM表达的假说。拟用apoM启动子重组报告基因检测、EMSA、染色质免疫沉淀实验（ChIP）等技术，鉴定人apoM基因启动子区的FXR负性结合元件，阐明FXR下调apoM表达的分子机制，进而明确apoM是FXR的一个新靶基因；经siRNA使apoM基因转录后沉默技术观察体外，体内抑制FXR使apoM表达上调后、可直接减少细胞apoA-I或血浆高密度脂蛋白（HDL）含量。通过本项目研究可深入揭示FXR→apoM→HDL的代谢调节通路及其在AS发生和发展中的重要生物学意义。

1、通过本项目实施（转染、EMSA、ChIP等实验），找到并鉴定FXR在人apoM基因 启动子区域上的特异结合序列DR2，证实apoM为FXR作用的新的靶基因。.2、通过小鼠在体实验，FXR激动剂（CDCA）可下调apoM基因表达，促进AS发生和发展，为AS的发生提供了新的分子调控机制。.3、初步回答了FXR→apoM→HDL代谢调节通路这一科学问题, 为深入阐明AS发生的分子机理提供新的科学依据。