Rheb通过与Bcl-rambo相互作用抑制乳腺癌细胞凋亡

小分子GTPase Rheb可通过激活哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR) 调控细胞生长增殖等生理过程。最近研究表明：(1)Rheb是重要的促癌蛋白，但其致瘤机理不清楚；(2)除mTOR外，Rheb还有其他的靶分子与生理功能。我们通过酵母双杂交筛选到Bcl-rambo（一种Bcl-2家族的促凋亡蛋白）是Rheb新的相互作用蛋白。免疫共沉淀实验证实乳腺癌细胞MCF-7中内源性rambo可与Rheb相互作用，Rheb可抑制过表达rambo引起的MCF-7细胞凋亡。本课题将深入研究Rheb与rambo相互作用的结构基础、调节机制及其与乳腺癌细胞凋亡之间的关系，并通过病例标本探讨Rheb、rambo与乳腺癌发生发展的关系，以建立Rheb与细胞生长、凋亡这两个调控细胞增殖中心事件之间的联系，为Rheb致癌机理提供新内容。阻断Rheb与rambo相互作用、诱导乳腺癌细胞凋亡也可作为潜在的乳腺癌治疗靶点。

小分子GTPase Rheb是一种肿瘤促进分子，但其致癌机制不清楚。本项目发现Rheb可与一种Bcl-2家族的促凋亡蛋白-Bcl-rambo相互作用并抑制其凋亡促进功能，并深入研究了Rheb与rambo相互作用的结构基础、调节机制及其与乳腺癌细胞凋亡、乳腺癌发生之间的联系。我们发现：(1) 证实Rheb与rambo之间存在直接相互作用，Rheb Switch I结构域、rambo 跨膜结构域TM与BH No结构域分别参与这一相互作用，(2) Rheb与rambo相互作用依赖于GTP，且与Rheb细胞内定位有关。(3) 证明Rheb可通过与rambo相互作用抑制乳腺癌MCF-7细胞凋亡。(4) Rheb在乳腺癌组织中高表达，但未发现Rambo与乳腺癌发生有明显相关性。(5) 靶向抑制mTORC2，或同时靶向抑制mTOR1/2可非常有效地促进乳腺癌细胞凋亡，并抑制乳腺癌细胞迁移，提示第二代mTOR抑制剂比rapamycin在治疗乳腺癌中有更大优势。(6) 证实Rheb是法尼基转移酶抑制剂治疗非小细胞肺癌(NSCLC)的关键靶点。这些结果建立了Rheb与肿瘤细胞凋亡之间的联系，为Rheb致癌机理提供新内容。