高表达双链RNA激活凋亡寡聚体的转基因猪的培育

The Double-stranded RNA (dsRNA) Activated Caspase Oligomerizer (DRACO) is a new antiviral protein discovered in 2011, with broad-spectrum antiviral activity. The protein contains an N-terminal dsRNA binding domain and a C-terminal activated apoptosis domain. Binding the N-terminal with dsRNA produced by virus activates the DRACO, the activated DRACO induces the infected cell death to prevent the proliferation of virus in the body. The discoverers' intention is to develop a new type of antiviral drugs. As researchers engaged in the transgenic animals for years, we recognize that this protein may be a new antiviral factor applying in the breeding of disease resistance animal.Thereby, we plan to produce the transgenic pig highly expressing the DRACO antivirus protein using somatic cell nuclear transfer technology.The transgenic pig woule have the ability to directly resist a variety of viruses , further more ,due to the vector contains a signal peptide,the serum of the transgenic pig will contain high concentration of antiviral protein ,which can be used for the antiviral treatment of other herds and also in application for human viral diseases after purified. Therefore, the production of DRACO transgenic pig not only promotes the development of China's pig industry, but also has great significance in the protection of human public health .

双链RNA激活凋亡寡聚体（DRACO）是2011年才发现的一种新的抗病毒蛋白，具有广谱的抗病毒作用。该蛋白是由细胞内本身存在的双链RNA-结合蛋白与凋亡激活蛋白融合而成，与病毒产生的双链RNA结合后可激活凋亡蛋白，从而抑制病毒在体内的扩散。DRCACO的发现者的初衷是开发一种新型的抗病毒药物，申请者结合自己在转基因克隆猪的领域的技术优势，另辟蹊径,利用体细胞克隆技术，将双链RNA激活凋亡寡聚体转入猪体内，使其高表达，获得能够直接抵抗多种病毒的转基因猪；另一方面，由于在载体构建中插入了分泌信号肽,可从转基因猪中获取含有高浓度DRACO蛋白的血清，该血清不仅可以直接用于其他猪只的抗病毒治疗，而且经高度纯化后，还可以用作人类病毒性传染病的新蛋白药物。因此，DRACO转基因猪的获得不仅可推动我国养猪业的发展，同时，对保护人类公共卫生健康也具有重要意义。

双链RNA激活凋亡寡聚体（DRACO）是一种新的抗病毒蛋白，其由细胞内本身存在的双链RNA-结合蛋白与凋亡激活蛋白融合而成，与病毒产生的双链RNA结合后可激活凋亡蛋白，从而抑制病毒在体内的扩散，具有广谱的抗病毒作用。本课题结果表明，DRACO 在细胞及转基因猪水平均有明显的抗病毒效果。 主要的学术成果包括：1. 完成DRACO表达载体的构建及抗病毒能力的检测; 2. 获得了ROSA 26-DRACO定点整合克隆猪级胎儿成纤维细胞; 3.获得了ROSA26-DRACO转基因猪，细胞功毒实验表明，DRACO对猪瘟病毒和伪狂犬病毒都具有明显的抗病毒能力。 该DRACO转基因猪的获得不仅可推动养猪业的发展，同时有可能成为第一种走向市场应用的转基因抗病动物模型。此外，通过该项目的实施，发表相关SCI 论文16篇。