基于活性的蛋白质组分析(ABPP)确认中药分子雷公藤内酯醇的细胞靶点

Triptolide is a structure unique ditepene triopoxide isolated from a traditional Chinese medicine plant (lei gong teng) with anti-inflammatory, immunosppressive and antitumor activities. At the cellular level, triptolide shows potent anti-proliferative activities against most US NCI cancer cell lines. It also induces apoptosis in a number of cancer cells. At the molecular level, triptolide was shown to interfere with transcription factors including NF-κB, p53, NF-AT and HSF-1. A number of putative cellular targets have been proposed to date, including calcium channel polycystin-2, membrane protease ADAM10, dCTP pyrophosphatase (DCTPP1), kinase-regulating protein TAB1, Xeroderma Pigmentosum B (XPB), and but none appeared to be correct and can account for its diverse biological activities. Hence, the aim of this project is to identify the true cellular targets of triptolide under native cellular environments by activity-based protein profiling (ABPP).

雷公藤内酯醇（Triptolide）是从传统中药雷公藤中分离出来的具有三个环氧结构的二萜化合物，其具有广泛的抗炎，免疫抑制，抗肿瘤活性。在细胞水平上，雷公藤内酯醇对大多数肿瘤细胞的增殖有抑制作用，也可以诱导许多肿瘤细胞的凋亡。在分子水平上，雷公藤内酯醇显示通过干扰NF-κB、P53、NF-A和HSF-1等许多转录因子来发挥作用。到目前为止已经有一些假定的靶点蛋白被报道，包括钙离子通道polycystin-2、膜蛋白酶ADAM10、dCTP焦磷酸酶(DCTPP1)、以及激酶调节蛋白TAB1，XPB以及Peroxiredoxin I，但是这些结果（靶点）还是不能清楚解释其生物活性原理。所以，本项目利用基于活性的蛋白质组分析（activity-based protein profiling, ABPP）技术在活细胞中确认雷公藤内酯醇的真正靶标。

雷公藤内酯醇（Triptolide）是从传统中药雷公藤中分离出来的具有三个环氧结构的二萜化合物，其具有广泛的抗炎，免疫抑制，抗肿瘤活性。在细胞水平上，雷公藤内酯醇对大多数肿瘤细胞的增殖有抑制作用，也可以诱导许多肿瘤细胞的凋亡。在分子水平上，雷公藤内酯醇显示通过干扰NF-κB、P53、NF-A和HSF-1等许多转录因子来发挥作用。到目前为止已经有一些假定的靶点蛋白被报道，包括钙离子通道polycystin-2、膜蛋白酶ADAM10、dCTP焦磷酸酶(DCTPP1)、以及激酶调节蛋白TAB1，XPB以及Peroxiredoxin I，但是这些结果（靶点）还是不能清楚解释其生物活性原理。所以，本项目利用基于活性的蛋白质组分析（activity-based protein profiling, ABPP）技术在活细胞中确认雷公藤内酯醇的靶标。.项目执行期间，我们实现了多个探针分子的设计合成、活性测试以及靶点的钓取和富集，最终通过生物质谱和系列分子生物学实验确认靶标蛋白为Hsp90AB1。