多杀性巴氏杆菌跨膜输出蛋白基因的选择克隆和分析

在已构建完成的pMBL载体基础上，新构建含可调控启动子的跨膜输出蛋白基因选择克隆载体，应用已知跨膜输出蛋白基因进行克隆验证，测定并比较构建载体的选择克隆特异性、启动子的可调控性和漏表达程度、相应检测方法的方便性和灵敏度等，以调整并最终确定用于选择克隆组成型表达和特殊条件诱导表达的跨膜输出蛋白基因的载体结构和操作条件；进一步选择多杀性巴氏杆菌C48-1和P1059二个不同血清性的菌株，区别克隆组成型表达和特殊条件诱导表达的跨膜输出蛋白基因，测序，并将测得的序列进行Blast、SignalP等分析，获得相应的生物信息学数据；为寻找多杀性巴氏杆菌交叉保护因子（CPFs）及其它与免疫原、毒力等相关的基因奠定基础，并为进一步克隆和研究其它细菌致病力、免疫原性相关的跨膜输出蛋白基因提供有力的平台工具。