CP31398联合靶向miRNA介导节段性反式剪切技术修复突变型p53基因治疗消化道肿瘤

消化道肿瘤中p53突变常见，且p53突变与其发病密切相关．目前与其相关的基因治疗包括导入野生型p53（wt p53）或减少突变型p53(tp53)，因其无法兼顾上述两方面，故难以获得理想疗效。反式剪切核酶(Trans-splicing ribozyme)和反式剪切(Trans-splicing)通过修复突变型p53而实现兼顾上述两个方面的目的，但在实际运用中效能有限。本研究拟运用一种新的生物技术：阶段性反式剪切（segmental trans-splicing, STS），其可以修复tp53, 且有效产生wt p53。此外，拟运用组织特异性的miRNA，实现其在肿瘤细胞的特异表达。在此基础上结合小分子化合物CP-31398, 诱导p53靶基因的表达，协助处理那些运用STS后未能表达wt p53和tp 53未被纠正的肿瘤细胞，从而有望为p53突变相关的消化道肿瘤的治疗提供新的选择。

消化道肿瘤中p53 突变常见，且p53 突变与其发病密切相关。基因治疗为p53突变的肿瘤提供一个新的治疗思路。目前常用针对p53突变肿瘤的基因治疗包括导入野生型p53（wt p53）或减少突变型p53(tp53)；但是上述手段无法同时增加野生型p53和减少突变型p53， 故难以获得理想疗效。trans-splicing（反式剪切）的技术运用于点突变的单基因遗传病的治疗。它通过互补序列与含有点突变的致病基因前mRNA 结合，再通过反式剪切作用，以野生型mRNA 取代点突变的mRNA; 故此技术可减少突变型mRNA，表达正常mRNA。鉴于此,本研究首次构建针对突变型p53的反式剪切载体，将其转染入含p53突变的结肠癌和原发性肝癌细胞株，其可以修复突变型p53, 产生野生型p53，诱导p53下游基因的表达，进而诱导肿瘤细胞凋亡、周期阻滞,抑制细胞增殖等。在结肠癌和原发性肝癌皮下移植瘤模型中，其诱导p53下游基因的表达，进而抑制肿瘤细胞增殖和肿瘤生长。. 此外，本研究同时对小分子化学物质CP-31398对于p53突变的肿瘤细胞(结肠癌和肝癌)生物学效应进行评价;证实CP-31398在p53突变的结肠癌和原发性肝癌的细胞株内可诱导p53靶基因的表达，导致肿瘤细胞凋亡、周期阻滞、增殖的抑制，进而在细胞和整体的动物模型上可以抑制肿瘤细胞生长，发挥抑癌作用。