ABCG2介导甲氨蝶呤(MTX)细胞外转运对银屑病治疗效果的影响

甲氨蝶呤（MTX）是治疗银屑病的理想药物，但它潜在的系统不良反应限制了其在银屑病中的应用。近年的研究发现肿瘤细胞膜上的ABCG2转运泵可以介导MTX及其多聚盐（MTX-PGs）的细胞外排，阻断ABCG2功能将增加细胞对MTX的敏感性。本项目中，我们首先检测ABCG2在银屑病皮损中的表达及分布，通过ABCG2 cDNA转染、siRNA干扰技术或使用特异性抑制剂，初步明确ABCG2对HEK293和银屑病药靶细胞（原代分离和培养的表皮KC,外周血T细胞和内皮细胞）内MTX、MTX-PGs浓度影响和其介导的胸甘酸合成情况，并分析胞内叶酸和叶酸聚合物浓度变化。最后，我们借助人工皮和银屑病皮损-SCID鼠模型，外用柔性纳米脂质体包裹的MTX和ABCG2抑制剂，研究MTX在皮内滞留量和动物模型的组织病理学变化，旨在探讨ABCG2介导MTX外排对银屑病治疗的影响，为银屑病新的外用药物的研发提供理论依据。

本项目中，我们开展了ABCG2在银屑病皮损中的表达及分布研究，借助体外细胞学实验，进一步明确ABCG2 对细胞内MTX及其聚合物浓度的影响和药效学功能的介导作用，将ABCG2抑制剂和MTX制成外用剂型，外用于银屑病动物模型，完成了ABCG2在银屑病皮损中的表达及分布的检测及其对Hacat细胞功能的调控；完成MTX柔性纳米脂质体、MTX囊泡微球两种外用剂型的制备，并对其表征和稳定性进行了考察；优化并筛选了新型ABCG2小分子抑制剂OSI-930及衍生物并完成功能研究；探讨并发现了新的MTX治疗银屑病的药理机制在于介导了细胞的凋亡作用，进一步明确了MTX的细胞内浓度受到ABCG2和CD147的共同调控；同时我们发现CD147通过影响ABCG2细胞内定位和二聚体的形成来影响其转运功能，两者共同参与调控肿瘤的化疗耐药；目前我们成功建立了咪喹莫特诱导的银屑病鼠模型，正在完成活体动物的外用药物筛选工作。通过以上研究，以第一作者或通讯作者发表SCI论文3篇，总影响因子为12.03，会议论文2篇并受邀做口头发言，获国家发明专利1项，获得“湖南省优秀博士学位论文”、“湖南省自然科学奖”等相关奖励。