FOLFOX4化疗诱导的抗肿瘤免疫效应增强及在大肠癌免疫治疗中的应用

以奥沙利铂（OXA）和5-氟尿嘧啶（5-Fu）为基础的FOLFOX4方案是目前转移性大肠癌的一线治疗方案，而化疗药物对于造血和免疫系统的损伤是其主要的毒副作用，近年来的研究表明，一些化疗药物不再仅是"免疫抑制者"，相反可以通过各种途径增强机体抗肿瘤免疫效应。本课题主要研究OXA和5-Fu诱导肿瘤细胞的"免疫性死亡"（Immune Death）以及产生的危险信号（DAMPs），通过TLR4等模式识别受体活化抗原递呈细胞，从而诱导固有免疫和获得性免疫应答增强；研究OXA和5-Fu对肿瘤细胞表面膜分子的改变，抑制肿瘤细胞分泌免疫抑制因子以及去除免疫抑制性细胞等方面的作用，从而降低肿瘤的免疫抑制，增强机体的抗肿瘤免疫应答，进而阐明FOLFOX4的化疗方案在转移性大肠癌治疗过程中的免疫学效应，并进一步探讨采用树突状细胞疫苗联合FOLFOX4化疗提高转移性大肠癌的临床疗效及其机制。

FOLFOX方案是目前治疗进展期结肠癌的主要化疗方案，化疗药物奥沙利铂（OXA）与5-氟尿嘧啶（5Fu）是该化疗方案中关键的化疗药物。本研究探讨化疗药物OXA和5Fu促进结肠癌细胞释放内源性危险信号分子（Danger-associated molecular patterns, DAMPs）、研究这些分子对DC的生物学效应的影响，以及OXA 和/或5Fu诱导的结肠癌细胞刺激的DC在体内诱导的抗肿瘤效应。结果表明，OXA/5-Fu可以诱导结肠癌细胞释放热休克蛋白70（Heat shock protein 70，HSP70）分子及人高迁移率组蛋白（High mobility group box1, HMGB1）以及表面钙网织蛋白（Calreticulin, CRT），OXA 联合5Fu治疗可以诱导临床结肠癌的患者血清中HMGB1, HSP70分子增加，这些危险信号可以明显上调DC表面CD40, CD86, HLA-DR分子，以及促进DC分泌TNF-α, IL-1β, IL-6 和趋化因子MIP-1α, MIP-1β, RANTES 和 IP-10，以及上调Th1细胞免疫，并且该效应是通过DC表面的TLR4受体介导的。将OXA 和/或5Fu作用于结肠癌细胞刺激的DC免疫同系的小鼠，其脾脏细胞IFN-γ分泌细胞数量明显多于单纯结肠癌细胞刺激的DC免疫小鼠，经体外诱导可产生对CT26细胞特异性的CTL。同时经OXA 和/或5Fu作用于结肠癌细胞刺激的DC免疫小鼠对CT26的肿瘤生长有明显的抑制作用，且可以延长荷瘤小鼠的生存时间。本研究的结果证明了化疗药物OXA和5Fu可以诱导结肠癌细胞危险信号的释放，增强肿瘤细胞的免疫原性，激活抗原提呈细胞，从而诱导更强的抗肿瘤免疫效应。