赖氨酸锰在肉仔鸡小肠中吸收的分子机理研究

本项目通过自然饲喂和体外培养条件下,不同铁水平调控小肠上皮细胞中转运蛋白DMT1的表达及其对肉仔鸡小肠中赖氨酸锰吸收的影响，研究赖氨酸锰中锰在肉仔鸡小肠中以锰离子吸收途径转运的竞争吸收假说；通过体外培养条件下，赖氨酸转运系统y+、b(0，+)和y+L的抑制剂或促进剂调控小肠上皮细胞中相关赖氨酸转运载体的表达及其对肉仔鸡小肠上皮细胞中赖氨酸锰吸收的影响，研究赖氨酸锰在肉仔鸡小肠中以赖氨酸吸收途径转运的完整吸收假说；从分子水平上深入阐明赖氨酸锰在肉鸡小肠中的吸收机理，揭示赖氨酸络合锰与无机锰离子在肉仔鸡小肠吸收机理上的差异，为新型锰添加剂的开发和高效利用、减少动物微量元素的排放污染，奠定坚实的理论基础。

本项目主要研究赖氨酸锰与硫酸锰在肉鸡小肠中吸收机制的差异。体内饲喂1日龄肉鸡不添加锰的基础饲粮7天，然后再饲喂添加0、80或160mg Fe/kg（低、中或高铁）和0或100 mg Mn/kg （来源于硫酸锰和赖氨酸锰）的基础饲粮35天。结果发现，中铁组21日龄肉鸡体重显著高于（P < 0.05）高铁组。锰源及其与铁水平的互作对 2-6 周肉鸡的生产性能无显著影响。赖氨酸锰显著提高了（P < 0.05）14日龄肉鸡胫骨中锰含量和42日龄肉鸡肝脏中锰含量。高铁饲粮增加了（P < 0.05）血浆中的锰含量，尤其在不添加锰条件下更明显；赖氨酸锰组血浆中的锰含量显著高于（P < 0.05）硫酸锰组。高铁饲粮比低铁和中铁饲粮增加了（P < 0.13）肉鸡肠道中DMT1和FPN1 mRNA的表达。体外鸡小肠上皮细胞对赖氨酸锰的吸收显著高于（P < 0.05）硫酸锰；赖氨酸锰增加了（P < 0.05）小肠上皮细胞中DMT1和FPN1的表达。培养液中添加N-ethylmaleimide（碱性氨基酸转运系统y+抑制剂）、Cycloheximide (碱性氨基酸转运系统B0,+促进剂)和BCH (中性氨基酸转运系统y+L抑制剂)对小肠上皮细胞中DMT1、FPN1和CAT1的表达无显著影响；与硫酸锰组相比，赖氨酸锰显著增加了（P < 0.05）小肠上皮细胞rBAT mRNA表达；尤其是添加Cycloheximide后，增加幅度更大（P < 0.05）。与硫酸锰组相比，赖氨酸锰显著增加了（P < 0.05）y+LAT mRNA表达；添加BCH后，抑制了y+LAT mRNA表达。添加Cycloheximide增加了（P < 0.05）赖氨酸锰的吸收，添加BCH降低了（P < 0.05）赖氨酸锰的吸收；但二者对硫酸锰吸收无显著影响。无论在高铁还是低铁条件下，鸡小肠上皮细胞对赖氨酸锰的吸收均高于（P < 0.05）硫酸锰。低铁提高了（P < 0.05）DMT1和FPN1的表达；高铁条件下，赖氨酸锰提高了（P < 0.05）DMT1和FPN1的表达。.综合体内外结果表明，在肉鸡小肠中，硫酸锰可能通过DMT1和FPN1转运；而赖氨酸锰除了通过二价离子锰转运通道转运外，还可能通过碱性氨基酸转运B0,+系统和中性氨基酸转运y+L系统转运。