通过改良的SDS法获得了高质量的荔枝幼果RNA,并构建了高质量的cDNA文库,分析了已发表的植物多酚氧化酶基因的结构。发现植物多的酚氧化酶基因具有两个保守区,根据此特点设计一对简并引物,通过PCR的方法扩增荔枝多酚氧化酶基因两个保守区之间的cDNA片段。将此cDNA片段用地高辛标记制备探针,从荔枝细幼果的cDNA文库中筛选编码荔枝多酚氧化酶的全长cDNA,获得5个阳性克隆,测序结果表明编码荔枝多酚氧化酶的cDNA全长为1998bp,编码584个氨基酸。该cDNA在大肠杆菌中表达大约60KD的蛋白质,此外将cDNA反向插入到pBI121植物表达载体,获得了荔枝多酚氧化酶基因的反义RNA植物表达载体,正准确转化荔枝,以期获得抗褐变的荔枝新品系。
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数据更新时间:2023-05-31
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