骨桥蛋白调控子宫内膜异位症AKT/MMPs传导通路的机制研究

确切的发生机制和有效的药物治疗是子宫内膜异位症（EMS）亟待解决的难题之一。我们前期大鼠内异症模型研究显示：内异症大鼠在位、异位内膜中骨桥蛋白（OPN）与MMP-9表达显著高于对照组，且二者表达呈正相关，结合国内外研究我们推测：OPN可能通过经典的PI3K/ AKT/NF-KB信息通路，激活依赖NF-KB 的NIK，介导粘附因子MMPs和uPA的高表达，促进异位细胞的粘附和侵袭。为验证此假说，我们原代分离培养人EMS腺上皮细胞、OPN激活剂干预，RT-PCR等方法测定细胞中OPN、AKT/p-AKT、NIK、MMPs及uPA表达差异及相关关系，确定AKT/MMPS传导通路介导EMS异位细胞粘附的机制；结合大鼠EMS模型，探讨OPN在此通路中的作用，雌孕激素干预前后腺上皮细胞、大鼠在位、异位组织中OPN、NIK等因子表达的差异，为EMS临床药物干预治疗寻找靶点，为临床合理选择药物提供理论依据

子宫内膜异位症是妇科常见良性疾病，却有着类似恶性肿瘤的黏附，侵袭及远处转移等生物学行为。本课题组通过内膜移植法建立大鼠EMS模型及，后经过雌孕激素及其相关类药物干预、免疫组化，western blot ，RT-PCR等实验方法证实OPNM,MMP-9,NF-KBp65,uPA等因子在大鼠在位，异位内膜中均呈高表达且各因子之间呈明显的正相关，雌激素能够上调OPN及MMP-9的表达，可能与内异症患者内膜腺上皮细胞的迁移相关；雌激素结合孕激素能够上调OPN及MMP-9的表达及细胞的侵袭性,高于单一雌激素刺激；OPN基因沉默能够明显下调MMP-9蛋白的表达，并使细胞的侵袭性下降。通过子宫内膜异位症患者在位内膜原代细胞分离培养，western blot ，RT-PCR等实验方法检测各因子在腺上皮细胞中的表达情况，并通过OPN/NF-KBp65 siRNA干扰原代腺上皮细胞，及慢病毒包绕质粒干扰腺上皮细胞，检测干扰前后各因子的变化情况及细胞侵袭性的变化，证实了OPN通过经典信息传导通路激活PI3K/ AKT/NF-KB通路，介导粘附因子uPA 和MMPs的高表达，促进异位细胞的粘附和侵袭的机制；OPN通过NF-KB通路干预MMP9的表达继而改变细胞的异位侵袭性，即NF-KB通路在OPN介导MMP9的细胞粘附好侵袭中发挥重要作用。 子宫内膜异位症的药物治疗中特异药物的研发提供必要的科学依据。