黄芪-丹参药对及其组分对肾纤维化JAK/STAT信号途径的干预作用

采用体内单侧输尿管梗阻（UUO）模型和体外肾小管上皮细胞培养相结合的实验方法，从核酸和蛋白两个水平研究Janus 蛋白酪氨酸激酶-信号转导子和转录激活子(JAK/STAT)炎症信号途径及内源性抗纤维化因子细胞极性蛋白-3（Par-3蛋白）、肝细胞生长因子（HGF）在肾纤维化过程中的作用。从整体、器官、细胞、分子四个水平探讨黄芪-丹参药对及其有效组分黄芪皂甙、丹参总酚酸配伍对JAK/STAT炎症信号途径的干预作用以及其对内源性抗纤维化因子的诱导作用，为黄芪-丹参药对及其有效组分防治肾纤维化的临床应用提供理论基础，为临床应用中药组分配伍防治慢性肾脏病提供理论与实验依据，将有助于阐明常用中药药对抗肾纤维化药效物质基础及其优势的现代科学理论基础。

课题完成情况：课题组严格按照基金申请书的研究目标和基金计划书完成了全部研究，核心期刊发表论著3篇，省级专业期刊发表论著1篇，综述2篇。收到核心期刊录用论著1篇，待发表论著2篇。培养毕业硕士研究生2名，在读研究生2名。参加全国会议1次。 2010 年1－12月由项目负责人李均以及所指导的遵义医学院2008 年级科学学位硕士研究生曹轶璇, 2009 年级硕士研究生王冬,于广东省医学实验动物中心比较医学研究平台,SPF 动物实验室完成了项目的动物实验。2011 年1-12 月负责人及指导研究生王冬，于贵州省细胞工程重点实验室和贵州省基础药理学重点实验室，完成了离体培养细胞实验研究。2012年1－12年课题负责人及其指导的研究生阳小敏、周萍、赵任杰和付旭完成了实验后期工作。. 重要结果简述：动物实验研究发现，黄芪丹参药对及其成分可以保护单侧输尿管梗阻大鼠的肾小管功能，一定程度改善肾纤维化病理，能有效减少Col I、Col Ⅲ、α-SMA在肾组织的沉积与表达，促进E-cadhcrin在UUO大鼠肾组织的表达等作用，从而具有延缓慢性肾脏病进展作用，机制可能与其干预UUO大鼠肾小管上皮细胞转分化及肾纤维化JAK/STAT信号通路有关。细胞研究结果发现，黄芪丹参药对及其有效组分含药血清在高糖损伤条件下可分别通过诱导肾小管上皮细胞HGF、 PAR-3表达；抑制JAK2表达,影响JAK/STAT信号途径从而发挥对肾小管上皮细胞的保护作用。黄芪丹参组分不同比例配伍研究发现，黄芪总皂甙丹参总酚酸组分1：1组和2：1组具有抑制肾小管上皮细胞转分化作用，组分1:1配伍组则明显降低JAK2、STAT1、STAT3蛋白表达，与福辛普利组相当。说明组分配伍1:1组能通过抑制JAK/STAT通路而发挥抑制肾纤维化作用，提示该比例组分有可能为最佳比例配伍。. 本项目从整体、器官、细胞、分子四个水平探讨了黄芪-丹参药对及其有效组分对JAK/STAT炎症信号途径的干预作用以及其对内源性抗纤维化因子的诱导作用，为黄芪-丹参药对及其有效组分防治肾纤维化的临床应用提供了理论基础，为临床应用中药组分配伍防治慢性肾脏病提供了理论与实验依据。