心肌细胞线粒体ATP敏感性钾通道相关蛋白的筛选和结构预测

位于心肌细胞线粒体内膜的线粒体ATP敏感性钾通道(MitoKATP通道)是预处理心肌保护的关键靶点，但其基因和蛋白组成仍不清楚,对MitoKATP通道蛋白组成的研究有助于深入研究预处理心肌保护机制和开发适用于临床的特异性MitoKATP通道开放剂。本课题通过采用MitoKATP通道特异性开放剂二氮嗪长时间激动培养心肌细胞，使MitoKATP通道蛋白表达下调；然后提取线粒体内膜蛋白，采用ICAT联合串联质谱技术，通过比较对照组和MitoKATP通道蛋白下调组线粒体内膜蛋白的表达，筛选出表达下调的蛋白；通过生物信息学胞内定位分析，筛选出线粒体蛋白；用蛋白质结构分析软件分析其膜蛋白特性，筛选出膜蛋白。根据剩余蛋白的基因组成，采用RNA干扰技术筛选出参与MitoKATP通道开放的内膜蛋白，即MitoKATP相关蛋白，用软件进行结构预测和ATP结合域分析，为最终找到MitoKATP通道蛋白打下基础。