基于微透析-色谱指纹图谱联用的"内病外治"中药凝胶剂穴位吸收机制及评价方法研究

"内病外治"是中药一种传统有效地治疗手段，与国外的经皮给药相比，它特点在于选择穴位给药，中药成分复杂，穴位吸收机制不清楚，缺乏适宜的评价方法是中药内病外治发展的瓶颈。本课题以治疗哮喘作用明确的消喘膏为药物模型，选取肺腧穴和非穴位皮肤部位，采用微透析-HPLC指纹图谱研究消喘膏凝胶在乳猪的经皮渗透动力学，探讨穴位给药与非穴位给药的皮肤药动学和血流动力学规律，阐明其"内病外治"作用机理；通过对中药凝胶剂的药动力学特征与其体外药物释放和透皮转运机制相结合进行分析，以及制剂学指标（黏度、稠度、pH值）与离体经皮渗透速率、扩算速率等生物学指标的相关性，建立适宜中药多组分多靶点的 "内病外治"的评价方法。本项目旨在探索在中药凝胶剂"内病外治"的作用机理，通过该项目研究预期建立一套适宜"内病外治"的中药凝胶剂评价方法。本项目的研究，有助于拓展中药的发展空间，深化中医药"内病外治"的理论。

穴位给药作用机制目前尚不清楚，本课题选取腧穴（肺腧、心腧、膈腧）和非腧穴，采用微透析联用液相色谱-质谱方法研究复方白芥子凝胶中4种代表性成分的动力学，结合不同穴位给药的药效学实验，揭示中药穴位给药的特异性。. 与非腧穴穴位位给药相比，复方白芥子凝胶剂经肺腧、心腧、膈腧穴位给药，达峰时间较短（Tmax），芥子碱硫氰酸盐分别为2.5、3h，延胡索分别为3、3.5h，而6-姜酚与细辛脂素差别不大，均为4h；各指标性成分最大血药浓度（Cmax）均较非腧穴给药高，芥子碱硫氰酸盐分别为147.9、125.0 ng.mL-1，延胡索乙素分别为103.2、94.4 ng.mL-1，6-姜酚分别为30.8、22.8 ng.mL-1，细辛脂素分别为15.3、12.2 ng.mL-1；各指标性成分AUCtot均较非腧穴穴位给药高，芥子碱硫氰酸盐分别为2142、1775 ng.mL-1.h，延胡索乙素分别为1290 、964.1 ng.mL-1.h，6-姜酚分别为221.9、169.1 ng.mL-1.h，细辛脂素分别为88.0、72.4 ng.mL-1.h。. 药效比较研究发现：（1）豚鼠血清及BALF中IL-4 含量（ng.L-1），正常组分别为1.096±0.494、17.173±2.801，哮喘组分别为3.265±0.848、27.197±4.617，腧穴给药组分别为：1.760±0.452、19.893±3.050，非腧穴给药组分别为：3.001±0.635、23.916±3.588；（2）豚鼠血清及BALF中IFN-γ含量（ng.L-1），正常对照组分别为51.430±8.14、126.595±22.542，哮喘模型组分别为0.164±4.511、79.185±12.450，腧穴给药组分别为：47.181±8.622、110.973±12.433，非腧穴给药组分别为：28.338±3.102、89.272±13.270。复方白芥子凝胶剂穴位给药使呼吸道黏膜可逆转局部和全身Th1/Th2 失衡，减轻气道慢性炎症，且同剂量给药条件下肺腧、心腧、膈腧穴位给药效果较非腧穴部位给药好,差异显著(P＜0.01)。. 本课题分别选取腧穴（心腧、肺腧、膈腧）与非腧穴区对复方白芥子凝胶剂从药动学到药效学两个方面进行了研究，对于研究中药穴位给药有一定的借鉴意义。