从胆碱能抗炎通路探讨电针足三里保护脓毒症肺损伤的机制研究

Protection of lung is very important in sepsis. In clinical practice, electroacupuncturing at Zusanli (ST36) achieved desired effect. According to previous studies, electroacupuncturing Zusanli can activate the systemic cholinergic anti-inflammatory pathway to protect sepsis animals. But the mechanism of acupuncture at Zusanli on sepsis-induced acute lung injury (ALI) is still unclear. In this study, we will establish a post-Cervical-vagotomy, a post-Subdiaphragamatic-vagotomy and a post-splenectomy sepsis model in rats, in the state of excluding systemic cholinergic anti-inflammatory pathway by different way, to evaluate the effect of electroacupunturing at Zusanli on the lung cholinergic system and lung protection. The expression of HMGB1, NF-κB and other laboratory index will be used to evaluate the inflammatory/anti-inflammatory station in lung and effect of lung protection. Nicotine (a α7nAchR agonist) and Methyllycaconitine (a α7nAchR antagonist) will be used as control measures. In all, the study aims to provide a scientific basis for acupuncture therapy in sepsis-induced ALI.

防护肺损伤在脓毒症治疗中具有重要意义。临床上应用足三里电针治疗取得了良好效果。据现有研究，电针足三里可激活全身性胆碱能抗炎通路发挥治疗作用，但对肺脏的作用机制尚不明确。本项目拟通过建立颈迷走神经切断、腹腔迷走神经切断、脾切除后脓毒症大鼠模型，在不同途径剔除全身性胆碱能抗炎通路影响的状态下，应用α7nAchR激动剂烟碱、α7nAchR拮抗剂甲基牛扁亭作为对照，以肺组织HMGB1、NF-κB等作为观察指标，从全身及肺脏局部胆碱能抗炎通路探讨电针足三里对肺内源性及肺外源性两种脓毒症大鼠模型肺损伤的作用，为针刺治疗脓毒症肺损伤提供科学依据。

背景：据报道，针刺足三里在干预脓毒症肺损伤（ALI）有一定优势，胆碱能抗炎通路（CAP）可能是改善脓毒症的主要机制。据此，本研究提出从胆碱能抗炎通路探讨针刺足三里对脓毒症ALI的作用及机制。.主要研究内容：建立稳定的颈迷走神经切断、膈下迷走神经切断及脾切除后的脓毒症大鼠模型，并应用PNU-282987（特异性α7nAChR激动剂）、甲基牛扁亭（特异性α7nAChR拮抗剂）等工具药作为对照，在不同位点剔除全身CAP的情况下，探讨电针足三里对肺内源性及肺外源性两种不同脓毒症大鼠模型肺脏胆碱能系统及其炎症反应的影响。.重要结果及其科学意义：1.采用LPS气道内滴入构建肺内源性脓毒症ALI模型，CLP构建肺外源性脓毒症ALI模型，两种模型组动物24h内出现明确的肺组织损伤病理学改变、肺泡毛细血管通透性增加、炎症反应明显，符合美国胸科协会ALI动物模型诊断标准，但LPS可造成的ALI严重程度更为明显且稳定。2.生存分析结果：在两种脓毒症ALI模型，无论是与造模后同期麻醉组还是与非同期麻醉组相比，电针足三里均可明显改善脓毒症ALI模型大鼠7天生存率（LPS+同期麻醉组 20%，LPS+非同期麻醉组 13.3%，LPS+电针组 60%，P＜0.05；CLP+同期麻醉组40%，CLP+非同期麻醉组33.3%，CLP+电针组80%，P＜0.05）。3.电针足三里可改善脓毒症ALI。同时伴见肺乙酰胆碱转移酶活性上升，肺NF-κB表达下降，炎症因子水平下降，提示电针足三里可能通过神经电刺激乙酰胆碱转录、合成、释放增加而激活肺脏局部CAP产生抗炎作用。非经非穴电针对ALI的改善作用明显减弱。4.电针足三里后肺组织α7nAChR表达无明显增加，在使用α7nAChR激动剂或拮抗剂后，电针足三里的肺损伤改善作用减低或消失，提示电针足三里不是通过增强肺组织α7nAChR表达或增强肺组织α7nAChR与激动剂结合而产生作用。5.颈迷切或膈下迷切后，电针足三里对脓毒症ALI的改善作用虽有减弱，但仍有部分显现，提示迷走神经的完整性不是电针足三里改善脓毒症ALI作用的全部必备条件。脾切后电针足三里的改善作用基本未再显现，提示脾脏可能在电针足三里的抗炎作用中有关键性作用。