miR-132调控胆碱能抗炎通路对小鼠脓毒症肺损伤保护作用的实验性研究

抑制肺泡巨噬细胞过度活化、降低肺内炎症反应是保护脓毒症肺损伤的根本措施。胆碱能抗炎通路通过分泌乙酰胆碱与巨噬细胞膜上的胆碱能受体结合，抑制巨噬细胞活化，具有炎症抑制作用。国内外及本课题组在前一国家自然科学基金项目中发现microRNA与炎症调控密切相关。最新报道miR-132能抑制巨噬细胞内乙酰胆碱酯酶表达，减少其对乙酰胆碱的水解。但尚未研究其对炎症反应的调控作用。本项目在前期已证实LPS诱导肺泡巨噬细胞炎症反应会引起miR-132表达上调的基础上，拟探索性的将miR-132体外转染小鼠肺泡巨噬细胞，观察其对肺泡巨噬细胞活化和炎症因子释放的影响；并创新性将专门用于体内实验的改进型in vivo-jetPEI介导的miR-132由气道内滴入小鼠脓毒症肺损伤模型，观察miR-132对肺内炎症反应的调控作用，探讨其对脓毒症小鼠肺损伤的保护作用及机制，为脓毒症肺损伤的治疗提供新思路。

抑制肺泡巨噬细胞过度活化、降低肺内炎症反应是保护脓毒症肺损伤的根本措施。胆碱能抗炎通路通过分泌乙酰胆碱与巨噬细胞膜上的胆碱能受体结合，抑制巨噬细胞活化，具有炎症抑制作用。最新报道miR-132能抑制巨噬细胞内乙酰胆碱酯酶表达，减少其对乙酰胆碱的水解。但尚未研究其对炎症反应的调控作用。我们通过体内外转染miR-132，探讨上调miR-132对胆碱能抗炎通路的影响，结果发现：（1）在LPS诱导的肺泡巨噬细胞炎症反应模型中，LPS诱导炎症因子表达升高的同时也诱导miR-132的表达增加，体外上调miR-132通过靶向AchE mRNA，抑制AchE蛋白表达，从而减少AchE对Ach的水解作用，从而增强ACh对NF-κB及STAT3活化的抑制作用减少了炎症因子的产生；（2）采用盲肠结扎穿孔术构建脓毒症肺损伤模型，并且通过气管内滴入 in vivo-jetPEITM 介导的miR-132，达到上调肺内miR-132的表达的目的，并通过抑制AchE蛋白的表达，降低AchE活性，有效抑制了肺内炎症因子的释放，减轻肺损伤，综上，miR-132通过增强胆碱能抗炎通路的抗炎作用，抑制肺内炎症反应，减轻肺损伤，为脓毒症肺损伤的治疗提供新思路。