海洛因依赖大鼠VTA和海马神经元阿片受体及CREB表达与可塑性研究

海洛因依赖已成为世界性公害，其依赖的中枢机制尚有待深入研究。目前认为，中脑腹侧被盖区（VTA）和海马是脑内引起阿片类物质依赖的重要部位。本项目通过建立海洛因急慢性给药、CPP和自身给药模型，采用CREB磷酸化抑制剂和激动剂干预海洛因依赖大鼠，用电子显微镜、免疫组化、Western blot、膜片钳等技术，观察海洛因依赖大鼠VTA和海马神经元超微结构、阿片受体、CREB的细胞定位和表达的变化；记录VTA和海马神经元的可塑性变化，研究与VTA和海马神经元可塑性密切相关的受体信号转导分子（阿片受体、CREB、AMPA、NR2B、NR2A、BDNF、c-fos）的变化及相互作用机理，以阐明海洛因依赖过程VTA和海马神经元形态、受体、CREB表达和功能的改变及其相互调控机理，进一步阐明海洛因依赖的中枢机制，为解除海洛因依赖提供实验和理论依据。

海洛因成瘾已成为社会公害。药物成瘾是一种慢性、复发性脑。药物成瘾机制十分复杂，涉及中枢神经系统的多个脑区。近年来研究发现中脑腹侧被盖区在药物成瘾中起着关键作用。本试验通过建立海洛因成瘾大鼠模型，观察海马和中脑腹侧被盖区（VTA）神经元阿片受体（DOR、MOR）和CREB表达及其可塑性的研究。在体结果发现，DOR和MOR在VTA和海马均有表达，与对照组比较，海洛因成瘾大鼠DOR和MOR的表达降低，而CREB蛋白的磷酸化增多。分别用纳洛酮和Naltrindole阻断MOR和DOR，能部分抑制CREB磷酸化的增多。海洛因成瘾大鼠，海马LTP降低，但与对照组比较无统计学差异；VTA-Nac之间存在突触传递的通路，且海洛因成瘾组LTP的PS低于对照组，提示在海洛因的作用下，该通路的突触传递发生了可塑性的变化。离体实验结果发现，VTA区的DA神经元TH表达上调，由NMDA受体介导的DA神经元膜电流降低。另外，海洛因急性处理HEK293细胞DOR、MOR磷酸化水平增高。.该研究为海洛因成瘾的机理提供了理论依据，并为治疗提供了一定思路。