肝细胞胆管侧细胞膜新极性分子MH2、MH3、MH20和MH27抗原的鉴定及功能研究

肝细胞胆管侧细胞膜极性分子（HCMPMs）是肝细胞胆汁排泄生理功能的关键分子，其功能障碍或表达异常可导致严重的肝内胆汁淤积。已知的HCMPMs不能完全解释胆汁排泄的生理过程及肝内胆汁淤积的病理机制，因此寻找新的HCMPMs尤为重要。MH2、MH3、MH20和MH27是本所发现的4株特异性识别HCMPMs的单抗，组织芯片和Western blot检测其所识别的抗原为不同HCMPMs。这些分子是否为新的HCMPMs，其参与胆汁排泄的作用机制及在胆汁淤积性肝病中的病理意义如何？本研究拟采用免疫沉淀、双向电泳、质谱分析和cDNA文库筛选等技术针对这4株单抗所识别的抗原进行鉴定，从而寻找到新的HCMPMs，通过生物信息学分析、siRNA、转运实验和免疫组化等技术研究新的HCMPMs参与胆汁排泄的分子功能，为进一步明确肝细胞胆汁排泄生理功能的分子机制以及探讨肝内胆汁淤积性肝病的发病机制提供实验依据。

肝细胞胆管侧细胞膜极性分子（HCMPMs）是肝细胞胆汁排泄生理功能的关键分子，其功能障碍或表达异常可导致严重的肝内胆汁淤积。已知的HCMPMs不能完全解释胆汁排泄的生理过程及肝内胆汁淤积的病理机制，因此寻找新的HCMPMs尤为重要。MH2、MH3、MH20和MH27是本所发现的4株特异性识别HCMPMs的单抗，组织芯片和Western blot检测其所识别的抗原为不同HCMPMs。本研究通过激光共聚焦、免疫电镜进一步确认MH2、MH3和MH20单抗识别的抗原在肝细胞胆管侧细胞膜上呈极性分布；转运实验证实MH2和MH3抗体可以部分地阻断CMV对葡萄糖醛酸化合物（3[H]E217ßG）的转运活性，其中MH2抗体的阻断作用更强，并且MH2对CMV的转运活性的阻断作用呈浓度依赖性，提示MH2识别的抗原可能为一种新的葡糖糖转运体。免疫沉淀、质谱分析等抗原鉴定实验证实MH3识别的抗原为LAMP2；且LAMP2在胆汁淤积性疾病PBC中的表达明显高于无胆汁淤积性疾病，提示其对胆汁淤积性疾病可能具有重要的病理诊断意义。