宫颈癌患者HLADRhi调节性T细胞亚群的产生机制、生物学功能及临床意义研究

Cervical cancer is a severe disease mainly caused by human papilloma virus (HPV) persistent infection, which has posed a great therat on women's health. Immunosurveillance plays a critical role against the development of cervical cancer, however, it is poorly understood which key factor(s) compromise the effective immune responses in cervical cancer patients. Regulatory T cell (Treg) is one of key regulatory cell types whose primary role is to downregulate immune respones. In our early studies, we have identified a population of highly activated HLADRhi Treg subset in the blood and tumor tissue of cervical cancer patients, raising the possibility that this Treg subset could play an important role in cervical cancer development. Based on these findings, the current research project is dedicated to perform the following studies: 1) to investigate the keypathways and relevant mechanisms responsible for the generation of HLADRhi Treg subset in cervical cancer patients; 2) to characterize biological features of HLADRhi Treg subset and study their immune regulatory roles; 3) to explore and evaluate the predictive and prognostic values of HLADRhi Treg subset and related T cell biomarkers in cervical cancer. Collectively, this project will not only provide critical information to help to uncover the immune status and underlying regulatory mechanisms in cervical cancer, but alsoharbor the potential to provide novel clues to facilitate the prevention and treatment of this severe disease.

宫颈癌是主要由人类乳头瘤病毒(HPV) 持续感染引起的一类严重危害女性健康的疾病。免疫监视能力下降是导致宫颈癌发生发展的关键因素，但目前尚不清楚导致宫颈癌患者免疫力下降的关键负性调控因素。调节性T细胞(Treg)是机体最重要的免疫负性调控细胞之一，在前期的工作中，我们发现宫颈癌患者血液和肿瘤组织中存在着一群高度活化的HLADRhi Treg亚群，提示这群细胞可能在宫颈癌发生发展过程中发挥了重要的免疫调节作用。在上述工作的基础上，本项目拟开展如下研究:1)阐明宫颈癌患者体内高度活化Treg亚群的生成途径和机制； 2)研究宫颈癌患者高度活化Treg亚群的生物学特性，阐明其免疫调节作用和机理；3) 探索高度活化Treg亚群及相关T细胞指标作为宫颈癌预测和预后标志物的价值。本研究不但对于阐明宫颈癌的免疫状态及其内在调节机制有着重要的意义，而且也可为宫颈癌的预防和治疗提供新的思路。

调节性T细胞(Treg)在调控机体免疫耐受中起重要作用，但对癌症诱导的免疫编辑起负性调控作用。在前期的工作中，我们发现宫颈癌患者血液和肿瘤组织中存在着一群高度活化的HLADRhi Treg亚群，但是其在宫颈癌中的作用不明。因此，本研究旨在对宫颈鳞癌患者的外周血和肿瘤组织中的Treg细胞亚群进行广泛深入的研究。我们首先证实相比宫颈癌前病变患者和健康人群，宫颈鳞癌患者外周血的比例明显升高；HLADRh iTreg细胞高表达一系列抑制和活化免疫标志物；高表达激活TCR的转录分子BATF和IRF4，但是TCR交联后，HLADRhi Treg钙离子内流下调。体外研究发现HLADRh iTreg细胞细胞表现出明显的增殖和凋亡活性，且具有明显的免疫抑制能力。多色染色的多标记免疫组化（mIHC）发现肿瘤微环境中的HLADRh iTreg细胞和宫颈癌的恶性程度相关，间质中高密度的HLADRh iTreg细胞和患者的无疾病生存期相关。因此通过本研究我们发现了一个HLADRh iTreg细胞作为一种新型的免疫标志物用于宫颈癌的预后和疗效检测中， 并有可能成为晚期和复发宫颈癌的免疫治疗靶点。.为进一步明确肿瘤特征和宿主免疫的相关性， 我们又进一步对宫颈癌组织进行了驱动基因突变的分析，我们发现PIK3CA的突变率最高达13.6%，且多见于鳞癌组织，KRAS及HER2基因在腺癌、腺鳞癌及其它少见类型宫颈癌组织中突变率明显高于鳞癌组织；KRAS基因突变是宫颈癌复发的独立预后指标；具有ERBB2突变的患者预后差于携带PIK3CA突变的患者，而优于携带KRAS突变的患者。因此上述基因的突变检测可作为预后指标，指导宫颈癌术后治疗决策。.最后我们对宫颈癌患者中PIK3CA E545K、E542K热点突变的功能和致癌机制进行了研究，我们发现PIK3CA E545K、E542K突变通过促进β-catenin表达及核转位抑制SIRT3转录进而提高宫颈癌糖酵解水平。.本研究结果不但对于阐明宫颈癌的免疫状态及其内在调节机制、以及宫颈癌常见基因突变的致癌机制有着重要的意义，而且也可为宫颈癌的预防和治疗提供新的免疫和靶向标志物。