益肺宣肺降浊方对血管性痴呆大鼠cAMP/PKA-CREB信号转导通路的影响

血管性痴呆(VaD)发病率逐年上升，严重危害人类的身心健康。目前中医药防治VaD的研究主要从中医五脏理论中的心肝脾肾着眼，益肺宣肺降浊方是依据"从肺论治痴呆"的新观点拟定的经验方，前期的临床实践已证实其具有良好的疗效，但其作用机制尚未明了。.本研究通过制备大鼠VaD模型，应用原位杂交、Western blot和流式细胞术等技术，观察益肺宣肺降浊方对VaD的神经保护作用及对cAMP/PKA信号转导通路相关基因cAMP、p-CREB、PKA、synapsin I、CaMPKⅡ和BDNF、c-fos、c-jun在大鼠海马区表达的变化以及神经元凋亡情况；采用基因芯片和qRT-PCR技术研究cAMP/PKA信号转导通路，在中药干预后神经保护效应中的调控作用及其信号传递的规律，以进一步探讨其神经保护机制。为该方更好地应用于临床打下坚实的基础，同时也为VaD的中医治疗和合理用药提供科学依据和新研究思路。

cAMP/PKA-CREB信号转导通路在学习记忆形成机制中起着重要作用，而脑缺血诱导的学习记忆功能障碍与该通路功能损伤密切相关。复方中药益肺宣肺降浊方能有效治疗血管性痴呆，但潜在机制尚未清楚。项目研究采用反复夹闭大鼠双侧颈总动脉，导致大鼠脑部缺血再灌注损伤，进而损害大鼠学习记忆认知功能，成功构建血管性痴呆大鼠模型，并从cAMP/PKA-CREB信号转导通路探讨益肺宣肺降浊方防治血管性痴呆的机制。益肺宣肺降浊方治疗能有效改善该模型大鼠学习记忆能力和海马病理改变，提高海马PKA C-α、CREB、CaMPK-Ⅱ、synapsin I、synapsin II蛋白表达，以及促进CREB磷酸化；此外，益肺宣肺降浊方能有效抑制模型大鼠海马神经细胞凋亡，抑制凋亡相关蛋白Bax和c-Jun蛋白表达，而提高Bcl-2和c-fos蛋白表达。实验结果提示，益肺宣肺降浊方能增强cAMP/PKA-CREB信号通路的信号转导和抑制神经细胞凋亡改善血管性痴呆模型大鼠学习记忆功能，这至少部分揭示了益肺宣肺降浊方防治血管性痴呆的机制，为临床中医药治疗血管性痴呆与合理用药提供科学依据。