柯萨奇病毒感染的基因免疫干预研究

本研究通过逆转录PCR技术扩增并克隆了CBV3中国标准毒株编码主要中和抗原的VP1基因，经酶切和DNA测序证实克隆片段为该基因。将克隆的VP1基因亚克隆至真核表达载体PCEp4构建CBV3VP1的真核表达质粒PCEp4-CBV3VP1。经转染Hela细胞和免疫荧光检测，证明该表达系统可以在细胞内表达CBV3抗原。将PCEp4-CBV3 VP1接种动物体内，ELISA证明小鼠PCEp4-CBV3 VP1表达产物刺激可产生抗CBV3的特异性IgM，病毒中和实验证明产生的抗体可中和CBV3毒力，病毒攻击保护实验证明PCEp4-CBV3 VP1诱导产生的免疫可以使小鼠抵抗CBV3病毒攻击，起到疫苗的特异性预防作用。为柯萨奇病毒基因免疫干预的进一步研究奠定了基础。